Technologie hybridomu

použití monoklonálních protilátek je četné a zahrnuje prevenci, diagnostiku a léčbu onemocnění. Například monoklonální protilátky mohou rozlišovat podmnožiny B buněk a T buněk, což je užitečné při identifikaci různých typů leukémií. Kromě toho byly specifické monoklonální protilátky použity k definování markerů buněčného povrchu na bílých krvinkách a dalších typech buněk. To vedlo ke shluku diferenciační řady markerů. Ty jsou často označovány jako CD markery a definují několik stovek různých buněčných povrchových složek buněk, z nichž každá je specifikována vazbou konkrétní monoklonální protilátky. Takové protilátky jsou velmi užitečné pro fluorescenční aktivované třídění buněk, specifickou izolaci určitých typů buněk.

v diagnostické histopatologiiedit

pomocí monoklonálních protilátek lze tkáně a orgány klasifikovat na základě jejich exprese určitých definovaných markerů, které odrážejí tkáňovou nebo buněčnou genezi. Prostatický specifický antigen, placentární alkalické fosfatázy, lidského choriového gonadotropinu, α-fetoprotein a jiné jsou varhany-asociovaných antigenů a produkci monoklonálních protilátek proti těmto antigenům pomáhá v určení povahy primárního nádoru.

Monoklonálních protilátek jsou zvláště užitečné v odlišení morfologicky podobné léze, stejně jako pleurální a peritoneální mezoteliom, adenokarcinom, a v určení orgánu nebo tkáně původu nediferencované metastáz. Vybrané monoklonální protilátky pomáhají v detekci okultních metastáz (nádor neznámé primární původu) immuno-cytologická analýza kostní dřeň, ostatní tkáně aspiráty, stejně jako lymfatických uzlin a dalších tkání a může mít zvýšenou citlivost než běžné histopatologické barvení.

jedna studie provedla citlivý imunohistochemický test na aspirátech kostní dřeně u 20 pacientů s lokalizovaným karcinomem prostaty. Tři monoklonální protilátky (T16, C26, a AE-1), schopných rozpoznat membránové a cytoskeletální antigeny vyjádřené epiteliálních buněk k detekci nádorových buněk, byly použity v testu. Aspiráty kostní dřeně ze dne 22% pacientů s lokalizovaným karcinomem prostaty (stadium B, 0/5; Fáze C, 2/4), a 36% pacientů s metastatickým karcinomem prostaty (Stadium D1, 0/7 pacientů; Fáze D2, 4/4 pacientů) měl antigen-pozitivních buněk v kostní dřeni. Byl učiněn závěr, že imunohistochemické barvení kostní dřeně aspiráty jsou velmi užitečné pro detekci okultních metastáz kostní dřeně u pacientů s zřejmě lokalizované rakoviny prostaty.

i když immuno-cytochemie pomocí tumor-asociovaný monoklonálních protilátek vedla k lepší schopnost detekovat okultní buněk rakoviny prsu v aspiráty kostní dřeně a periferní krve, další rozvoj této metody je nutné před tím, než mohou být použity běžně. Jeden hlavní nevýhodou immuno-cytochemie je, že pouze tumor-asociovaný a ne tumor-specifické monoklonální protilátky jsou použity, a jako výsledek, některé zkřížené reakce s normální buňky mohou nastat.

pro účinné stádium rakoviny prsu a posouzení účinnosti proplachovacích režimů před infuzí autologních kmenových buněk je důležité detekovat i malá množství buněk rakoviny prsu. Imunohistochemické metody jsou pro tento účel ideální, protože jsou jednoduché, citlivé a zcela specifické. Franklin et al. provádí citlivé immuno-cytochemické test pomocí kombinace čtyř monoklonálních protilátek (260F9, 520C9, 317G5 a BrE-3) proti nádorové buněčné povrchové glykoproteiny identifikovat prsní nádorové buňky v kostní dřeni a periferní krvi. Z výsledků dospěli k závěru, že imuno-cytochemické barvení kostní dřeně a periferní krve je citlivý a jednoduchý způsob detekce a kvantifikace buněk rakoviny prsu.

jedním z hlavních důvodů metastatického relapsu u pacientů se solidními nádory je časné šíření maligních buněk. Použití monoklonálních protilátek (Mab) specifických pro cytokeratiny může identifikovat diseminované jednotlivé epiteliální nádorové buňky v kostní dřeni.

Jedna studie zprávy, na které vyvinul immuno-cytochemické procedury pro simultánní označování cytokeratinu součásti ne. 18 (CK18) a prostatického specifického antigenu (PSA). To by pomohlo při další charakterizaci šířeny jednotlivých epiteliálních nádorových buněk u pacientů s karcinomem prostaty. Dvanáct ovládání aspiráty od pacientů s benigní hypertrofií prostaty ukázala, negativní barvení, což dále podporuje specifičnost CK18 v detekci epiteliálních nádorových buněk v kostní dřeni.

ve většině případů maligního onemocnění komplikovaného výpotkem lze neoplastické buňky snadno rozpoznat. V některých případech však maligní buňky nejsou tak snadno vidět nebo jejich přítomnost je příliš pochybná na to, aby ji nazvala pozitivní zprávou. Použití imuno-cytochemických technik zvyšuje diagnostickou přesnost v těchto případech.

Ghosh, Mason a Spriggs analyzovali 53 vzorků pleurální nebo peritoneální tekutiny od 41 pacientů s maligním onemocněním. Konvenční cytologické vyšetření neodhalilo žádné neoplastické buňky. K hledání maligních buněk byly použity tři monoklonální protilátky (anti-CEA, Ca 1 a HMFG-2). Imunocytochemické značení bylo provedeno na nenatřených nátěrech, které byly uchovávány při teplotě -20 °C až 18 měsíců. Dvanáct z jedenačtyřiceti případů, ve kterých bylo provedeno Imunocytochemické barvení, odhalilo maligní buňky. Výsledkem bylo zvýšení diagnostické přesnosti přibližně o 20%. Studie dospěla k závěru, že u pacientů s podezřením na maligní onemocnění, imuno-cytochemické označování by měla být běžně používá při zkoumání cytologicky negativních vzorků a má důležité důsledky pro pacienta.

další aplikací imunocytochemického barvení je detekce dvou antigenů ve stejném nátěru. Dvojité barvení protilátkami s lehkým řetězcem as markery T A B buněk může naznačovat neoplastický původ lymfomu.

jedna studie uvádí izolaci buněčné linie hybridomu (klon 1E10), která produkuje monoklonální protilátku (IgM, k izotyp). Tato monoklonální protilátka vykazuje specifické Imunocytochemické barvení jadérek.

tkáně a nádory lze klasifikovat na základě jejich exprese určitých markerů pomocí monoklonálních protilátek. Pomáhají při rozlišování morfologicky podobných lézí a při určování orgánového nebo tkáňového původu nediferencovaných metastáz. Imunocytologická analýza kostní dřeně, tkáňových aspirátů, lymfatických uzlin atd. s vybranými monoklonálními protilátkami pomáhá při detekci okultních metastáz. Monoklonální protilátky zvyšují citlivost při detekci i malých množství invazivních nebo metastatických buněk. Monoklonální protilátky (Mab) specifické pro cytokeratiny mohou detekovat diseminované jednotlivé epiteliální nádorové buňky v kostní dřeni.