Northern blot

Un northernblot es un método de laboratorio utilizado para detectar moléculas de ARN específicas entre una mezcla de ARN. El blot norteño se puede utilizar para analizar una muestra de ARN de tejido o de tipo celular con el fin de medir la expresión de ARN de genes particulares. Este método fue nombrado por su similitud con el techniqueknown como una mancha sur.

El primer paso en un blot norte es desnaturalizar, o separar, el ARN dentro de la muestra en hebras individuales, lo que garantiza que las hebras se desplieguen y que no haya unión entre las hebras. Las moléculas de ARN se separan de acuerdo con sus tamaños utilizando un método llamado electroforesis en gel. Después de la separación, el ARN se transfiere desde el gel a una membrana secante.(Aunque este paso es lo que le da a la técnica el nombre de «mancha boreal», el término se usa típicamente para describir todo el procedimiento.) Una vez completada la transferencia, la membrana secante transporta todas las bandas de ARN originalmente en el gel. A continuación, la membrana se trata con una pequeña pieza de ADN o ARN llamada sonda, que ha sido diseñada para tener una secuencia que es complementaria a la secuencia de ARN aparticular en la muestra; esto permite que la sonda hibride, orbind, a un fragmento de ARN específico en la membrana. Además, la sonda tiene alabel, que es típicamente un átomo radiactivo o un tinte fluorescente. Por lo tanto, después de la hibridación, la sonda permite detectar la molécula de ARN de interés entre las muchas moléculas de ARN diferentes en la membrana.