Tecnología de hibridoma
El uso de anticuerpos monoclonales es numeroso e incluye la prevención, el diagnóstico y el tratamiento de enfermedades. Por ejemplo, los anticuerpos monoclonales pueden distinguir subconjuntos de células B y células T, lo que es útil para identificar diferentes tipos de leucemias. Además, se han utilizado anticuerpos monoclonales específicos para definir marcadores de superficie celular en glóbulos blancos y otros tipos de células. Esto llevó a la serie de marcadores de grupo de diferenciación. A menudo se les conoce como marcadores de CD y definen varios cientos de componentes diferentes de la superficie celular de las células, cada uno especificado mediante la unión de un anticuerpo monoclonal en particular. Estos anticuerpos son extremadamente útiles para la clasificación celular activada por fluorescencia, el aislamiento específico de tipos particulares de células.
En histopatología diagnósticaeditar
Con la ayuda de anticuerpos monoclonales, los tejidos y los órganos se pueden clasificar en función de su expresión de ciertos marcadores definidos, que reflejan la génesis tisular o celular. El antígeno prostático específico, la fosfatasa alcalina placentaria, la gonadotrofina coriónica humana, la α-fetoproteína y otros son antígenos asociados a órganos y la producción de anticuerpos monoclonales contra estos antígenos ayuda a determinar la naturaleza de un tumor primario.
Los anticuerpos monoclonales son especialmente útiles para distinguir lesiones morfológicamente similares, como el mesotelioma pleural y peritoneal, el adenocarcinoma y para determinar el origen de órganos o tejidos de metástasis indiferenciadas. Los anticuerpos monoclonales seleccionados ayudan en la detección de metástasis ocultas (cáncer de origen primario desconocido) mediante análisis inmunocitológico de médula ósea, aspirados de otros tejidos, así como ganglios linfáticos y otros tejidos, y pueden tener una mayor sensibilidad sobre la tinción histopatológica normal.
En un estudio se realizó un ensayo inmunohistoquímico sensible en aspirados de médula ósea de 20 pacientes con cáncer de próstata localizado. En el ensayo se utilizaron tres anticuerpos monoclonales (T16, C26 y AE-1), capaces de reconocer antígenos de membrana y citoesqueléticos expresados por células epiteliales para detectar células tumorales. Los aspirados de médula ósea de 22% de los pacientes de cáncer de próstata localizado (estadio B, 0/5; estadio C, 2/4) y 36% de los pacientes de cáncer de próstata metastásico (estadio D1, 0/7; Estadio D2, 4/4) tenían células antigénicas positivas en la médula ósea. Se concluyó que la tinción inmunohistoquímica de aspirados de médula ósea es muy útil para detectar metástasis ocultas de médula ósea en pacientes con cáncer de próstata aparentemente localizado.
Aunque la inmunocitoquímica con anticuerpos monoclonales asociados a tumores ha mejorado la capacidad de detectar células ocultas de cáncer de mama en aspirados de médula ósea y sangre periférica, es necesario desarrollar más este método antes de que pueda utilizarse de forma rutinaria. Un inconveniente importante de la inmunocitoquímica es que solo se utilizan anticuerpos monoclonales relacionados con tumores y no específicos de tumores y, como resultado, se puede presentar alguna reacción cruzada con células normales.
Para estadificar eficazmente el cáncer de mama y evaluar la eficacia de los regímenes de purga antes de la infusión autóloga de células madre, es importante detectar incluso pequeñas cantidades de células de cáncer de mama. Los métodos inmunohistoquímicos son ideales para este propósito porque son simples, sensibles y bastante específicos. Franklin et al. se realizó un ensayo inmunocitoquímico sensible utilizando una combinación de cuatro anticuerpos monoclonales (260F9, 520C9, 317G5 y BrE-3) contra glicoproteínas de superficie de células tumorales para identificar células tumorales de mama en médula ósea y sangre periférica. A partir de los resultados, concluyeron que la tinción inmunocitoquímica de médula ósea y sangre periférica es una forma sensible y sencilla de detectar y cuantificar las células cancerosas de mama.
Una de las principales razones de la recaída metastásica en pacientes con tumores sólidos es la diseminación temprana de células malignas. El uso de anticuerpos monoclonales (mAbs) específicos para citoqueratinas puede identificar células tumorales epiteliales individuales diseminadas en la médula ósea.
Un estudio informa de haber desarrollado un procedimiento inmunocitoquímico para el etiquetado simultáneo del componente de citoqueratina nº 18 (CK18) y del antígeno prostático específico (PSA). Esto ayudaría a seguir caracterizando las células tumorales epiteliales individuales diseminadas en pacientes con cáncer de próstata. Los doce aspirados de control de pacientes con hipertrofia prostática benigna mostraron tinción negativa, lo que refuerza aún más la especificidad de la CK18 en la detección de células tumorales epiteliales en la médula ósea.
En la mayoría de los casos de enfermedad maligna complicada por derrame, las células neoplásicas se pueden reconocer fácilmente. Sin embargo, en algunos casos, las células malignas no se ven tan fácilmente o su presencia es demasiado dudosa para llamarlo un informe positivo. El uso de técnicas inmunocitoquímicas aumenta la precisión diagnóstica en estos casos.
Ghosh, Mason y Spriggs analizaron 53 muestras de líquido pleural o peritoneal de 41 pacientes con enfermedad maligna. El examen citológico convencional no reveló células neoplásicas. Se utilizaron tres anticuerpos monoclonales (anti-CEA, Ca 1 y HMFG-2) para buscar células malignas. Se realizó un etiquetado inmunocitoquímico en frotis sin teñir, que se habían almacenado a -20 ° C hasta 18 meses. Doce de los cuarenta y un casos en los que se realizó la tinción inmunocitoquímica revelaron células malignas. El resultado representó un aumento de la precisión diagnóstica de aproximadamente un 20%. El estudio concluyó que en pacientes con sospecha de enfermedad maligna, el etiquetado inmunocitoquímico se debe usar de forma rutinaria en el examen de muestras citológicamente negativas y tiene implicaciones importantes con respecto al manejo del paciente.
Otra aplicación de tinción inmunocitoquímica es para la detección de dos antígenos en el mismo frotis. La tinción doble con anticuerpos de cadena ligera y con marcadores de células T y B puede indicar el origen neoplásico de un linfoma.
En un estudio se notificó el aislamiento de una línea celular de hibridoma (clon 1E10), que produce un anticuerpo monoclonal (IgM, isotipo k). Este anticuerpo monoclonal muestra tinción inmunocitoquímica específica de los nucleolos.
Los tejidos y los tumores pueden clasificarse en función de su expresión de determinados marcadores, con la ayuda de anticuerpos monoclonales. Ayudan a distinguir lesiones morfológicamente similares y a determinar el origen de órganos o tejidos de metástasis indiferenciadas. Análisis inmunocitológico de médula ósea, aspirados de tejidos, ganglios linfáticos, etc. con anticuerpos monoclonales seleccionados ayudan en la detección de metástasis ocultas. Los anticuerpos monoclonales aumentan la sensibilidad para detectar incluso pequeñas cantidades de células invasivas o metastásicas. Los anticuerpos monoclonales (mAbs) específicos para citoqueratinas pueden detectar células tumorales epiteliales individuales diseminadas en la médula ósea.