Hybridoomatekniikka
monoklonaalisten vasta-aineiden käyttö on runsasta ja sisältää sairauden ehkäisyn, diagnosoinnin ja hoidon. Esimerkiksi monoklonaaliset vasta-aineet voivat erottaa B-ja T-solujen alaryhmät, mikä on avuksi erilaisten leukemiatyyppien tunnistamisessa. Lisäksi on käytetty spesifisiä monoklonaalisia vasta-aineita määrittämään valkosolujen ja muiden solutyyppien solupinnan markkereita. Tämä johti klusterin eriyttämistä sarjan markkereita. Näitä kutsutaan usein CD-merkkiaineiksi, ja ne määrittelevät useita satoja erilaisia solujen solupinnan komponentteja, joista jokainen on määritelty sitoutumalla tiettyyn monoklonaaliseen vasta-aineeseen. Tällaiset vasta-aineet ovat erittäin hyödyllisiä fluoresenssilla aktivoitujen solujen lajittelussa, tietyntyyppisten solujen erityisessä eristämisessä.
diagnostisessa histopatologisessa tutkimuksessa
monoklonaalisten vasta-aineiden avulla kudokset ja elimet voidaan luokitella tiettyjen määriteltyjen merkkiaineiden ilmentymisen perusteella, jotka heijastavat kudoksen tai solun perimää. Eturauhasen spesifinen antigeeni, istukan alkalinen fosfataasi, ihmisen istukkagonadotropiini, α-fetoproteiini ja muut ovat elimiin liittyviä antigeenejä, ja monoklonaalisten vasta-aineiden tuotanto näitä antigeenejä vastaan auttaa määrittämään primaarikasvaimen luonteen.
monoklonaaliset vasta-aineet ovat erityisen hyödyllisiä morfologisesti samankaltaisten leesioiden, kuten keuhkopussin ja vatsakalvon mesoteliooman, adenokarsinooman, erottamisessa sekä erilaistumattomien etäpesäkkeiden elimen tai kudoksen alkuperän määrittämisessä. Valikoidut monoklonaaliset vasta-aineet auttavat okkulttisten etäpesäkkeiden (primaarista alkuperää tuntematon syöpä) havaitsemisessa immunosytologisella analyysillä luuytimestä, muista kudosperäisistä aspiraateista sekä imusolmukkeista ja muista kudoksista, ja niiden herkkyys voi olla tavallista histopatologista värjäytymistä suurempi.
yhdessä tutkimuksessa tehtiin herkkä immunohistokemiallinen määritys luuydinaspiraateilla 20: llä paikallista eturauhassyöpää sairastavalla potilaalla. Testissä käytettiin kolmea monoklonaalista vasta-ainetta (T16, C26 ja AE-1), jotka kykenevät tunnistamaan epiteelisolujen ilmaisemia kalvo-ja sytoskeletaalisia antigeenejä kasvainsolujen havaitsemiseksi. Luuytimessä oli antigeenipositiivisia soluja 22%: lla potilaista, joilla oli paikallinen eturauhassyöpä (Vaihe B, 0/5; vaihe C, 2/4) ja 36%: lla metastasoitunutta eturauhassyöpää sairastavista potilaista (vaihe D1, 0/7; vaihe D2, 4/4). Todettiin, että luuydinaspiraattien immunohistokemialliset värjäytymät ovat erittäin hyödyllisiä okkulttisten luuytimen etäpesäkkeiden havaitsemisessa potilailla, joilla on ilmeisesti paikallinen eturauhassyöpä.
vaikka immunosytokemia käyttäen tuumoriin liittyviä monoklonaalisia vasta-aineita on parantanut kykyä havaita piileviä rintasyöpäsoluja luuydinaspiraateissa ja ääreisveressä, tätä menetelmää on kehitettävä edelleen, ennen kuin sitä voidaan käyttää rutiininomaisesti. Yksi immunosytokemian merkittävä haittapuoli on se, että käytetään vain tuumoreihin liittyviä eikä kasvainspesifisiä monoklonaalisia vasta-aineita, ja tämän seurauksena voi esiintyä joitakin ristireaktioita normaalien solujen kanssa.
jotta voidaan vaiheistaa rintasyöpä tehokkaasti ja arvioida puhdistushoidon teho ennen autologista kantasoluinfuusiota, on tärkeää havaita pienetkin rintasyöpäsolumäärät. Immunohistokemialliset menetelmät ovat ihanteellisia tähän tarkoitukseen, koska ne ovat yksinkertaisia, herkkiä ja melko spesifisiä. Franklin ym. tehtiin herkkä immunosytokemiallinen määritys käyttämällä neljän monoklonaalisen vasta-aineen (260f9, 520C9, 317g5 ja BrE-3) yhdistelmää kasvainsolujen pintaglykoproteiineja vastaan luuytimen ja perifeerisen veren rintakasvainsolujen tunnistamiseksi. He päättelivät tulosten perusteella, että luuytimen ja ääreisveren immunosytokemiallinen värjäys on herkkä ja yksinkertainen tapa havaita ja kvantifioida rintasyöpäsoluja.
yksi tärkeimmistä syistä metastasoituneeseen relapsiin potilailla, joilla on kiinteitä kasvaimia, on pahanlaatuisten solujen varhainen leviäminen. Sytokeratiineille spesifisten monoklonaalisten vasta-aineiden (mAbs) käyttö voi tunnistaa disseminoituneita yksittäisiä epiteelikasvainsoluja luuytimessä.
yksi tutkimus raportoi kehittäneensä immunosytokemiallisen menettelyn sytokeratiinikomponentin nro 18 (CK18) ja eturauhasspesifisen antigeenin (PSA) samanaikaista merkitsemistä varten. Tämä auttaisi edelleen Luonnehdinta disseminoituneiden yksittäisten epiteelikasvainsolujen potilailla, joilla on eturauhassyöpä. Hyvänlaatuisesta eturauhasen liikakasvusta kärsivien potilaiden kahdessatoista verrokkiaspiraatissa havaittiin negatiivista värjäytymistä, mikä tukee edelleen ck18: n spesifisyyttä epiteelikasvainsolujen havaitsemisessa luuytimessä.
useimmissa effuusion komplisoimissa pahanlaatuisissa sairauksissa neoplastiset solut voidaan helposti tunnistaa. Joissakin tapauksissa pahanlaatuiset solut eivät kuitenkaan ole niin helposti nähtävissä tai niiden esiintyminen on liian epäilyttävää, jotta sitä voisi kutsua positiiviseksi raportiksi. Immunosytokemiallisten tekniikoiden käyttö lisää diagnostista tarkkuutta näissä tapauksissa.
Ghosh, Mason ja Spriggs analysoivat 53 keuhkopussin tai vatsakalvon nestenäytettä 41: ltä pahanlaatuista tautia sairastavalta potilaalta. Tavanomaisessa sytologisessa tutkimuksessa ei ollut havaittu neoplastisia soluja. Pahanlaatuisten solujen etsimiseen käytettiin kolmea monoklonaalista vasta-ainetta (anti-CEA, Ca 1 ja HMFG-2). Immunosytokemialliset merkinnät tehtiin tahranpoistoaineille, joita oli säilytetty -20 °C: ssa 18 kuukauden ajan. Niistä neljästäkymmenestäyhdestä tapauksesta, joissa immunosytokemiallinen värjäys tehtiin, kaksitoista paljasti pahanlaatuisia soluja. Tulos merkitsi diagnostisen tarkkuuden kasvua noin 20%. Tutkimuksessa todettiin, että potilailla, joilla epäillään pahanlaatuista sairautta, immunosytokemiallista merkintää tulisi käyttää rutiininomaisesti sytologisesti negatiivisten näytteiden tutkimisessa, ja sillä on merkittäviä vaikutuksia potilaiden hoitoon.
toinen immunosytokemiallinen värjäys on kahden antigeenin osoittamiseen samasta preparaatista. Kaksinkertainen värjäytyminen vaaleaketjuisilla vasta-aineilla sekä T-ja B-solujen markkereilla voi kertoa lymfooman neoplastisesta alkuperästä.
yhdessä tutkimuksessa on raportoitu hybridoomasolulinjan (klooni 1e10) eristämisestä, joka tuottaa monoklonaalista vasta-ainetta (IgM, k-isotyyppi). Tällä monoklonaalisella vasta-aineella on spesifinen nukleolin immunosytokemiallinen värjäytyminen.
kudokset ja kasvaimet voidaan luokitella niiden tiettyjen merkkiaineiden ilmentymisen perusteella monoklonaalisten vasta-aineiden avulla. Ne auttavat morfologisesti samankaltaisten vaurioiden erottamisessa ja erilaistumattomien etäpesäkkeiden elimen tai kudoksen alkuperän määrittämisessä. Immunosytologinen analyysi luuytimestä, kudosaspiraateista, imusolmukkeista jne. valittujen monoklonaalisten vasta-aineiden avulla voidaan havaita okkulttisia etäpesäkkeitä. Monoklonaaliset vasta-aineet lisäävät herkkyyttä havaita pieniäkin määriä invasiivisia tai metastasoituneita soluja. Sytokeratiineille spesifiset monoklonaaliset vasta-aineet (mAbs) voivat havaita disseminoituneita yksittäisiä epiteelikasvainsoluja luuytimessä.