PMC

14-vuotias, tiineenä oleva tamma, jolla oli American Quarterhevosyhdistyksen rekisteröintipaperit, ostettiin huutokaupasta maaliskuussa 2000 sillä tiedolla, että se oli jalostettu paint-oriksi. Tamma rekisteröitiin kiinteäksi kastanjaksi, jossa oli tähti, kaistale ja Nipsu, tumma täplä sierainten yläpuolella, valkoinen täplä oikeassa sieraimessa, eikä muita valkoisia merkkejä. Tamman isä, rekisteröity amerikkalainen maalihevonen, oli Sorrell overo-kuviolla.

tiineys ja synnytys olivat tapahtumaköyhiä, ja tammavarsa imetti spontaanisti 2 tunnin sisällä syntymästä. Tamma otti nopeasti vastaan varsan, joka oli tarhassa hyvin liikkuva ja utelias. Ainoat erikoiset havainnot olivat varsan selvästi valkoinen turkki ja mekoniumin läpäisemättömyys (Kuva 1). 12-16 tunnin kuluttua syntymästä varsalla alkoi näkyä ähkyn merkkejä.

kun varsaa tutkittiin 1.päivänä, se vaikutti hyvin epämukavalta ja vaihteli seisten, makuulla ja selällään pyörien. Se oli täysin valkoinen sinisillä irideillä. Pupillien valorefleksi ja uhkaava vaste olivat läsnä. Suun limakalvot ja kapillaarien täyttöaika olivat normaalit, mutta syke oli hieman koholla (110-120 lyöntiä/min). Keuhkoäänet lisääntyivät lievästi kranioventraalisissa keuhkokentissä. Kaikki nivelet, napa ja peräsuolen lämpötila (38°C) olivat normaalit. Merkittävin löydös oli borborygmin puuttuminen vatsan askultaatiosta. Ulostetta oli syvällä peräsuolessa. Kliiniset löydökset viittasivat mekonium-impaktioon tai todennäköisemmin Overo lethal white-oireyhtymään (OLWS). Tukihoitona annettiin 120 mL mineraaliöljyä peräruiskeena helpottamaan mekoniumitulpan kulkua, ja flunssan meglumiinia (Cronyxn; Vetrepharm, Belleville, Ontario) annettiin 150 mg, IV, vatsakipujen lievittämiseen. Vaste kivunlievitykseen huomattiin ja varsasta tuli makuuasentoon.

päivänä 2 varsalla oli edelleen ähkyn merkkejä. Eutanasiaa suositeltiin, ja tammasta ja varsasta otettiin verinäytteet OLWS-diagnoosin varmistamiseksi. Varsalle tehtiin eutanasia ja ruumiinavaus. Törkeän tutkimuksen perusteella varsalta puuttui pigmentti ja vatsa oli törkeästi laajentunut. Keuhkot olivat lievästi edematoottiset, mutta maksa, perna, munuaiset ja lisämunuaiset näyttivät normaaleilta. Vatsakalvonontelossa oli serosavuista ruskeaa nestettä, jonka epäillään vuotaneen suolistosta ennen kuolemaa ja kuoleman jälkeen. Suolisto-onnettomuudesta ei löytynyt näyttöä, eikä suolen pituudelta havaittu ahtaumia. Pienen paksusuolen ja peräsuolen serosaalipinta oli vaalea. Suurin osa suolistosta oli kaasutäytteistä, ja paksusuolen kauudellinen puoli oli laajentunut hiukkasilla. Näytteet (iho -, maksa -, keuhko -, suoli -, sydän -, perna -, munuais-ja silmänäytteet) kerättiin 10-prosenttisesti puskuroituun formaliiniin ja toimitettiin histopatologiseen tutkimukseen. Histologisesti ihossa ei havaittu melaniinia ja aktiivisia karvatuppia oli vähän. Monet munarakkulat olivat karvapeitteettömiä tai olivat katageenivaiheessa (siirtyminen aktiivisen ja lepäävän karvankasvun välillä). Maksa ja keuhkot olivat lievästi ruuhkautuneet. Muutamilla keuhkojen alueilla havaittiin aspiroituja levyepiteelisoluja ja kevyt mononukleaarisoluinfiltraatti. Paksusuoli oli normaali, lukuun ottamatta ganglion-solujen puuttumista, mikä oli yhteensopiva ileokolonisen aganglionoosin kanssa, kuten nähdään olws: ssä (2).

tamman ja varsan verinäytteet toimitettiin DNA-analyysia varten (Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory, College of Veterinary Medicine, University of Minnesota, St. Paul, Minnesota, USA), joka vahvisti tamman olevan heterotsygoottinen ja varsan olevan homotsygoottinen OLW-geenille.

Overo lethal white-oireyhtymää esiintyy vastasyntyneillä varsoilla, jotka saavat molemmilta vanhemmiltaan kopion mutatoituneesta OLW-geenistä. Hevoset, joilla on valkoinen Overo-kuviointi, ovat todennäköisemmin geenin kantajia kuin yksiväriset hevoset (2). Mutatoitunut geeni muuttaa hermoston harjusolujen migraatiota eli selviytymistä, mikä vaikuttaa melanosyyttien ja suoliston ganglioiden kantasoluihin. Sairastuneet varsat kärsivät ohutsuolen ja paksusuolen distaalisen osan submukosaalisen ja myenterisen hermosolmun aganglionoosista, mikä johtaa suoliston liikkumattomuuteen ja koliikkiin (2). Fenotyypillisesti muuttunut geeni aiheuttaa ihon pigmentin ja valkoisen turkin värin puutetta. Overo-turkiskuviota kuvataan valkoisina kuvioina kaulan ja vartalon sivu-ja ventraaliosissa, kun taas selkäpuolen kaularangan ja lannerangan sekä jalkojen kuviota, jossa on enemmän valkoista, kutsutaan tobianoksi (3). Overo-karvapeite-kuviota esiintyy muun muassa amerikkalaisessa paint Horsessa, American miniature Horsessa, half-Arabiassa, Täysiverisessä ja crop-Outissa (rekisteröimätön liiallisen valkoisen merkinnän vuoksi) quarterhevosessa (QH).

letaali OLWS-geeni on autosomaalinen dominantti, jolla on vaihteleva ilmentymä. Heterotsygooteilla on erilaisia valkoisia karvakuvioita, ja ne voivat hyvin harvoin olla yksivärisiä; esimerkiksi jos hallitseva letaaligeeni ei ilmene tai on spontaanisti mutatoitunut. Lisätutkimukset ovat tarpeen, jotta voidaan selittää, esiintyykö satunnaisesti yli-varsoja VÄRJÄÄMÄTTÖMILTÄ QH-vanhemmilta. Kaksi mutatoituneen geenin kantajaa on paritettava, jotta saadaan homotsygoottinen lethal white-varsa. Mendelin genetiikan mukaan Overo × Overo-parittelun odotetaan tuottavan 25% yksivärisiä varsoja, 50% Overo-varsoja ja 25% OLW-varsoja (1).

Kantakirjatiedot ja havainnot syntyneistä varsoista osoittavat, että todennäköisyys tuottaa olwsin jälkeläinen on alle 25%. Mahdollisia syitä tähän odottamattoman alhaiseen esiintymistiheyteen voivat olla OLW-varsojen ilmoittamatta jättäminen roturekisteröinteihin, homotsygoottivarsojen varhainen alkionmenetys tai kantajien suhteellinen osuus jalostuspopulaatiosta (1).

tappavan geenin periytymisen ymmärtäminen on tärkeää taloudellisista syistä, sillä maalit ovat suotavia länsimaisissa hevosnäyttelyissä, ja olisi etu pystyä tunnistamaan overo-geeniä kantavat hevoset (3). Virheelliset tiedot OLWS: n riskistä voivat estää ihmisiä käyttämästä Jalostuskantaa, jolla on Overo-verilinjoja. Tarkkojen geneettisten tietojen avulla kasvattajat voisivat välttää Overo-tappavaan geeniin liittyvät psykologiset ja taloudelliset menetykset testaamalla kantajakantaa ja jalostamalla tunnettuja Overoja vain todennetuille ei-Overoille.

koska OLWS-hoitoa ei ole, testaus on välttämätöntä sen esiintymisen estämiseksi (1). Ennen DNA-testausta kantajat tunnistettiin fenotyypillisesti valkoisen osuuden perusteella: mitä enemmän valkoista, sitä suurempi riski kantajaksi joutumiselle. Vaikka tämä tekniikka tunnisti useimmat kantajat, se oli epätarkka. On kehitetty DNA-pohjainen testi, joka tunnistaa hevoset, jotka ovat heterotsygootteja Overo lethal white-geenille. Alleelispesifinen polymeraasiketjureaktiotesti paikantaa ja vahvistaa spesifisen mutatoituneen kohdan endoteliinireseptori B-geenissä (EDNRB-geeni). Tämä kohta on tunnistettu Hirschsprungin tautia sairastavilla ihmisillä, joilla on samanlaisia ednrb-geenin mutaatiosta johtuvia maha-suolikanavan vaikutuksia. Ednrb-geenin DNA: n sekvensointi paljasti dinukleotidin tymiini-sytosiini-adeniini-guaniinimutaation. Tämä johtaa isoleusiini-aminohapon korvautumiseen lysiinillä EDNRB-proteiinin ensimmäisessä transmembraanidomeenissa (jota kutsutaan Ile118Lys-mutaatioksi) (4). EDNRB-proteiini vastaa alkioiden hermoharjusolujen säätelystä, jotka kehittyvät ganglioiksi ja melanosyyteiksi. Ednrb-geenin Ile118Lys-mutaation vuoksi homotsygooteilla varsoilla on vain 20% kontrollihevosten funktionaalisesta proteiinikyvystä (5). Suolistoon kohdistuva innervaatio on heikentynyt, mikä aiheuttaa kuolemaan johtavaa ummetusta. Heterotsygooteilla on yleisesti Overo-karvapeite ilman suoliston poikkeavuuksia. Heterotsygoottien fenotyyppiä selvittäneessä tutkimuksessa > 95% oli Overoja ja < 1% yksivärisiä (2). Overo-kuvion ilmentymisen vaihtelu ja kyvyttömyys ennustaa tarkkaa genotyyppiä fenotyypistä johtuvat siitä, että muut geenit ovat lisänneet valkoista väritystä. Jotta voidaan selittää OLW-varsan satunnainen esiintyminen yksivärisestä QH: sta, tarvitaan lisätutkimuksia tämän monitekijäisen periytymiskuvion ymmärtämiseksi. Turkin värinpilkahduksen, suoliston aganglionoosin ja EDNRB-geenin mutaatioiden yhteyttä on tutkittu hiirimalleilla (6,7). On mahdollista, että QH: n EDNRB-geeni mutatoituu spontaanisti tai mutatoituu nopeammin kuin jyrsijöillä (2).

asianmukainen näytteenotto on tärkeää DNA-analyysissä. Veri-tai hiusnäytteitä voidaan käyttää, mutta verestä on vaikea saada DNA: ta, ja veri on pidettävä kylmässä ja toimitettava laboratorioon 24 tunnin kuluessa. Hiusnäytteiden on sisällettävä juuret ja 15-20 karvaa, ja ne voidaan kerätä maneesista tai hännästä, eivätkä ne vaadi erityisiä pakkauksia (Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory, University of Minnesota, personal communication).

tämä tapaus osoittaa OLW-varsan klassisen kliinisen ja patologisen esiintymisen, jolla on epätavallinen vanhempainlinja. QH-tamma edustaa pientä osaa yksivärisistä heterotsygooteista.