TUNEL-värjäys ja TUNEL-määritys

Gao y et al. käytetään HRP-DAB TUNEL assay kit ab206386: ta hiiren munasarjojen kudososien analysointiin. A. jakso, jota käsitellään dnase I: llä positiivisena kontrollina. B. negatiivinen kontrolli ilman TdT-entsyymiä. C ja f. edustavat kokeelliset kuvat. TUNELIMÄÄRITYKSELLÄ värjätyt tumakotelot ovat ruskeita. Osia torjuttiin Metyylivihreällä.

Tunel-värjäysmenetelmien

TUNEL-värjäys / TUNEL-määritysprotokollat, joissa käytetään suoraan fluoresoivalla väriaineella merkittyä nukleotidia, ovat nopeampia kuin epäsuorat menetelmät, joissa käytetään joko vasta-ainetta tai streptavidiini-biotiinikompleksia, koska ne vaativat vähemmän värjäysvaiheita.

Biotiinimerkittyihin nukleotideihin perustuvat menetelmät voivat hyötyä streptavidiini-biotiinikompleksin monistumisesta. Ne vaativat ylimääräisiä estovaiheita endogeenisen biotiinin neutraloimiseksi ja taustavärjäyksen vähentämiseksi, vaikka nämä ovat yhteisiä kaikille tutkijoille, jotka käyttävät perinteistä kromogeenista immunohistokemiaa.

BrdU-pohjaiset menetelmät voivat myös tuottaa kirkkaamman signaalin, koska BrdU: ta on tyypillisesti helpompi liittää TdT-entsyymiin.

TUNEL staining/TUNEL assay methods

vuonna 2017 julkaistun 50 tutkimusraportin, jotka sisälsivät termin ”TUNEL Assay” tai ”TUNEL Staining”, suhteellinen Suosio paljasti, että:

– 50% papereista, joissa DUTP on konjugoitu suoraan FITC: hen

– 15% käytetty biotiini-dutp ja streptavidin-HRP

– 15% käytetty FITC-DUTP ja anti-FITC – vasta-aine konjugoituna HRP: hen

-12% käytetty digoksigeniini – dutp ja anti-digoksigeniini-vasta-aine konjugoituna joko fluoresoivaan väriaineeseen tai HRP: hen

– 8% käytti br-dutp: tä ja anti-brdu-vasta-ainetta, joka on konjugoitu fluoresoivaan väriaineeseen

kaikki tutkitut paperit käyttivät kuvantamisessa Tunel-määritystä virtaussytometrian sijaan. Kun HRP: tä käytettiin, DAB-substraattia lisättiin ruskean tahran aikaansaamiseksi. Yli 90% tutkimuspapereista käytti TUNEL-värjäyssarjaa.