VSV-ΔG-GFP Plasmidiekspressiovektori

plasmidi pVSV-ΔG-GFP koodaa replikatonin rajoittaman rekombinantti vesicular stomatitis-viruksen (rvsv) antigeenis-sense (tai positive-sense) RNA: ta, jossa glykoproteiini (G) geeni on korvattu GFP: llä. Tätä plasmidia käytetään yhdessä VSV-nukleokapsidia (n), fosfoproteiinia (P), glykoproteiinia (G) ja suurta polymeraasialayksikköä (l) koodaavien plasmidien kanssa VSV-g: n pseudotyypitetyn ΔG-GFP-viruksen talteenottoon, kuten kohdassa on kuvattu . ΔG-GFP: n antigenominen RNA ilmaistaan bakteriofagien T7-promoottorista pBS: ssä, jota on edelleen muokattu sisältämään hepatiittidelta-ribotsyymiä, jota käytetään tuottamaan VSV: n antigenomisen RNA: n tarkka 3′ – pää ja T7-terminaattorisarja, joka kloonattiin SacII-ja SacI-rajoituskohtien välillä PBS-SK+: ssa .

rekombinanttia vesicular stomatitis-Viru-ΔG: tä (rVSV-ΔG) on käytetty tuottamaan VSV-pseudotyyppejä, jotka sisältävät heterologisten virusten, myös sellaisten virusten, jotka vaativat voimakasta eristämistä, kirjekuorilykoproteiineja. Koska rvsv-ΔG: n infektiivisyys rajoittuu yhteen replikaatiokierrokseen, virussyöttöanalyysit voidaan tehdä pelkällä bioturvallisuustason 2 (BSL-2) suojauksella.

päätutkijan vastuulla on hakea institutionaalisen Bioturvallisuuskomitean hyväksyntä yhdistelmä-DNA: n, siirtogeenisten eläinten tai tarttuvien aineiden käytölle laboratoriotiloissaan ja ylläpitää institutionaalisen Bioturvallisuuskomitean hyväksyntää kyseisten materiaalien käytön aikana.

Michael A. Whittin laboratoriosta, Ft, Tennesseen yliopisto.

osa tutkijan liite-ohjelmaa.