Manuel de Pathologie Brute

Comment fonctionne le processus de décalcification?

Tout tissu contenant des os, des dents ou des calcifications doit être ENTIÈREMENT FIXÉ avant la décalcification. La décalcification doit être effectuée de telle sorte que le tissu puisse être sectionné dans la pièce brute avec une lame et / ou en histologie avec un microtome. Les fragments osseux rares (comme dans les marges de la moelle) peuvent être congelés frais (sans décalcomanie) tant qu’ils sont petits et peuvent être coupés avec le cryostat. Les matériaux non organiques tels que le ciment osseux, les obturations dentaires ou les métaux ne se décalcifient PAS et ne doivent PAS être soumis en cassettes.

Pour des conseils plus détaillés sur l’extraction d’échantillons complexes avec des os, voir cette présentation (pdf).

Quels sont les types de décalcificateurs?

• Les décalcificateurs d’acides forts (HCl, acide chlorhydrique) sont standard dans les laboratoires de pathologie. Ils décalcifient rapidement mais détruisent les acides nucléiques.
• Les décalcificateurs d’acides organiques modérés (acide formique) sont plus lents mais détruisent également les acides nucléiques.
• Les agents chélateurs tels que l’acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA) sont les plus lents mais aussi les meilleurs pour préserver les acides nucléiques.

Quand dois-je utiliser chacun de ces décalcificateurs?

Pour les spécimens Gros/ Tumoraux: Ne jamais décalcifier un spécimen entier avant de consulter d’abord un participant:

• Vérifiez s’il existe une biopsie non décalcifiée récente préexistante.
• Toujours essayer d’isoler les tissus lésionnels mous pour les soumettre SANS décalcification:
  • Tumeur molle à côté de l’os
  • Tumeur molle dans l’os
  • Tumeur non calcifiée
• Si ces deux critères ci-dessus ne sont PAS remplis, déterminez l’étendue de HCL vs EDTA en discussion avec un participant.
  • Des exemples de ces cas peuvent être une tumeur à prédominance ossifiée (comme un ostéosarcome) ou une tumeur infiltrant de manière diffuse un os sans composant mou.

Pour Les Biopsies:

• Toutes les biopsies de noyaux osseux non hémiques doivent être décalcifiées dans l’EDTA, car le besoin de tests moléculaires ne peut pas toujours être prédit. Reportez-vous à la page de grossissement de la biopsie de base pour plus de détails.
• Pour les échantillons buccaux de sensibilisation nécessitant une décalcification, reportez-vous à la page de grossissement de la biopsie buccale pour des instructions spécifiques.

Tout tissu dur pour lequel des tests moléculaires (NGS, FISH, etc.) peuvent être nécessaires ne doit PAS être décalcifié dans de l’acide (HCl). Il doit être décalcifié avec un décalcifiant doux (EDTA). Veuillez demander à un AP si vous avez besoin d’EDTA.

AUCUNE TUMEUR NE DOIT ÊTRE DÉCALCIFIÉE ENTIÈREMENT EN HCl. Si plusieurs sections / cassettes nécessitent une décalcification, assurez-vous d’en isoler pour une décalcification douce de l’EDTA, après la fixation.

Comment dois-je utiliser chacun de ces décalcificateurs?

• Pour HCl, petit tissu: Si votre tissu à décalcifier est petit et déjà dans une cassette, il peut être décalcifié dans le pot HCl commun. Assurez-vous de CONSIGNER votre étui et de surveiller chaque jour sa souplesse ou sa capacité à être coupé avec une lame. Si le tissu n’est pas prêt après 3 jours – veuillez consulter un AP ou un assistant pour déterminer les prochaines meilleures étapes.
• Pour HCl, gros tissus: Si le tissu est volumineux et intact, il doit être placé dans son propre récipient étiqueté avec un autocollant (nom du patient, MRN, chemin de surg #) et un autocollant HCl écrit à la main sur le récipient.
• Pour TOUS les HCl: Laver les cassettes pendant 10 minutes sous l’eau courante AVANT la décalcification de l’HCl (c.-à-d. lors du transfert du Formol vers l’HCl) et APRÈS la décalcification de l’HCl (c.-à-d. lors du transfert du HCl vers le Formol).
• Pour l’EDTA: Il n’existe actuellement aucun pot commun pour l’EDTA. Veuillez utiliser un récipient séparé étiqueté avec un autocollant (nom du patient, MRN, chemin de surg #) et un autocollant EDTA écrit à la main sur le récipient.
• Quand les tissus sont-ils « finis »? Le tissu est suffisamment décalcifié lorsqu’il peut être coupé avec une lame ou qu’il est souple.

Comment le processus de décalcification est-il facturé?

L’équipe de facturation vérifie la nécessité des frais de décalcification en recherchant deux éléments:

• Le mot  » décalcifié  » ou l’expression  » soumis après décalcification  » dans la description brute/résumé de la cassette.
• Une charge de décalcification présente sous forme de tache chez CoPath.

La charge de décalcomanie est automatiquement liée à certains types de pièces tels que la biopsie osseuse, les fragments d’os, la résection osseuse (88309), etc. Dans ces cas, si vous n’avez pas besoin de décalquer le tissu, supprimez la charge de décalcomanie.

Si la charge de décalcomanie n’est pas déjà liée (calques accidentels dans la thyroïde, léiomyome, etc.), ajoutez manuellement la charge de décalcomanie dans le champ Tache / Processus et documentez-la dans votre description brute. Vous n’avez PAS besoin de spécifier un numéro de cassette dans CoPath, cependant, veuillez spécifier la ou les cassettes décalées dans la description brute. La charge doit être ajoutée une fois par conteneur, quel que soit le nombre de cassettes décalées. Chaque récipient pour lequel un décalque est utilisé doit avoir le décalque « tache. »