TCEP

TCEP est souvent utilisé comme agent réducteur pour rompre les liaisons disulfures à l’intérieur et entre les protéines en tant qu’étape préparatoire à l’électrophorèse sur gel.

Par rapport aux deux autres agents les plus couramment utilisés à cet effet (dithiothréitol et β-mercaptoéthanol), le TCEP présente les avantages d’être inodore, un agent réducteur plus puissant, un agent réducteur irréversible (dans le sens où le TCEP ne se régénère pas — le produit final de clivage disulfure médié par le TCEP est en fait deux thiols/cystéines libres), plus hydrophile, et plus résistant à l’oxydation dans l’air. Il ne réduit pas non plus les métaux utilisés dans la chromatographie d’affinité des métaux immobilisés.

Le TCEP est particulièrement utile pour marquer les résidus de cystéine avec des maléimides. Le TCEP peut empêcher les cystéines de former des liaisons di-sulfure et contrairement au dithiothréitol et au β-mercaptoéthanol, il ne réagira pas aussi facilement avec le maléimide. Cependant, il a été rapporté que le TCEP réagissait avec le maléimide dans certaines conditions.

Le TCEP est également utilisé dans le processus d’homogénéisation des tissus pour l’isolement de l’ARN.

Pour les applications de spectroscopie ultraviolette–visible, le TCEP est utile lorsqu’il est important d’éviter une absorbance interférente de 250 à 285 nanomètres qui peut se produire avec le dithiothréitol. Le dithiothréitol absorbera lentement au fil du temps de plus en plus de lumière dans ce spectre à mesure que diverses réactions redox se produisent.