Technologie de l’hybridome
L’utilisation d’anticorps monoclonaux est nombreuse et comprend la prévention, le diagnostic et le traitement de la maladie. Par exemple, les anticorps monoclonaux peuvent distinguer des sous-ensembles de cellules B et de cellules T, ce qui est utile pour identifier différents types de leucémies. De plus, des anticorps monoclonaux spécifiques ont été utilisés pour définir des marqueurs de surface cellulaire sur les globules blancs et d’autres types de cellules. Cela a conduit au groupe de séries de marqueurs de différenciation. Ceux-ci sont souvent appelés marqueurs CD et définissent plusieurs centaines de composants de surface cellulaire différents des cellules, chacun étant spécifié par liaison d’un anticorps monoclonal particulier. De tels anticorps sont extrêmement utiles pour le tri cellulaire activé par fluorescence, l’isolement spécifique de types particuliers de cellules.
En histopathologie diagnostiquemodifier
À l’aide d’anticorps monoclonaux, les tissus et les organes peuvent être classés en fonction de leur expression de certains marqueurs définis, qui reflètent la genèse tissulaire ou cellulaire. L’antigène spécifique de la prostate, la phosphatase alcaline placentaire, la gonadotrophine chorionique humaine, l’α-fœtoprotéine et d’autres sont des antigènes associés à des organes et la production d’anticorps monoclonaux contre ces antigènes aide à déterminer la nature d’une tumeur primaire.
Les anticorps monoclonaux sont particulièrement utiles pour distinguer des lésions morphologiquement similaires, telles que le mésothéliome pleural et péritonéal, l’adénocarcinome et pour déterminer l’origine de l’organe ou du tissu de métastases indifférenciées. Les anticorps monoclonaux sélectionnés aident à la détection des métastases occultes (cancer d’origine primaire inconnue) par analyse immuno-cytologique de la moelle osseuse, d’autres aspirats tissulaires, ainsi que des ganglions lymphatiques et d’autres tissus et peuvent avoir une sensibilité accrue par rapport à la coloration histopathologique normale.
Une étude a effectué un test immuno-histochimique sensible sur des aspirats de moelle osseuse de 20 patients atteints d’un cancer de la prostate localisé. Trois anticorps monoclonaux (T16, C26 et AE-1), capables de reconnaître les antigènes membranaires et cytosquelettiques exprimés par les cellules épithéliales pour détecter les cellules tumorales, ont été utilisés dans le test. Les aspirations de moelle osseuse de 22% des patients atteints d’un cancer de la prostate localisé (stade B, 0/5; Stade C, 2/4) et de 36% des patients atteints d’un cancer de la prostate métastatique (patients au stade D1, 0/7; patients au stade D2, 4/4) avaient des cellules antigéniques positives dans leur moelle osseuse. Il a été conclu que la coloration immuno-histochimique des aspirats de moelle osseuse est très utile pour détecter les métastases occultes de la moelle osseuse chez les patients atteints d’un cancer de la prostate apparemment localisé.
Bien que l’immuno-cytochimie utilisant des anticorps monoclonaux associés aux tumeurs ait permis d’améliorer la capacité de détection des cellules occultes du cancer du sein dans les aspirats de moelle osseuse et le sang périphérique, le développement ultérieur de cette méthode est nécessaire avant qu’elle puisse être utilisée de manière routinière. Un inconvénient majeur de l’immuno-cytochimie est que seuls des anticorps monoclonaux associés à une tumeur et non spécifiques à une tumeur sont utilisés, et par conséquent, une réaction croisée avec des cellules normales peut se produire.
Afin de mettre en scène efficacement le cancer du sein et d’évaluer l’efficacité des schémas de purge avant la perfusion de cellules souches autologues, il est important de détecter même de petites quantités de cellules cancéreuses du sein. Les méthodes immuno-histochimiques sont idéales à cet effet car elles sont simples, sensibles et assez spécifiques. Franklin et coll. réalisation d’un test immuno-cytochimique sensible en utilisant une combinaison de quatre anticorps monoclonaux (260F9, 520C9, 317G5 et BrE-3) contre les glycoprotéines de surface des cellules tumorales pour identifier les cellules tumorales du sein dans la moelle osseuse et le sang périphérique. Ils ont conclu à partir des résultats que la coloration immuno-cytochimique de la moelle osseuse et du sang périphérique est un moyen simple et sensible de détecter et de quantifier les cellules cancéreuses du sein.
L’une des principales raisons de la rechute métastatique chez les patients atteints de tumeurs solides est la dissémination précoce des cellules malignes. L’utilisation d’anticorps monoclonaux (MAB) spécifiques des cytokératines permet d’identifier les cellules tumorales épithéliales individuelles disséminées dans la moelle osseuse.
Une étude rapporte avoir développé une procédure immuno-cytochimique pour le marquage simultané du composant cytokératine n ° 18 (CK18) et de l’antigène prostatique spécifique (PSA). Cela aiderait à caractériser davantage les cellules tumorales épithéliales individuelles disséminées chez les patients atteints d’un cancer de la prostate. Les douze aspirations témoins de patients atteints d’hypertrophie bénigne de la prostate ont montré une coloration négative, ce qui confirme la spécificité de CK18 dans la détection des cellules tumorales épithéliales dans la moelle osseuse.
Dans la plupart des cas de maladie maligne compliquée par un épanchement, les cellules néoplasiques peuvent être facilement reconnues. Cependant, dans certains cas, les cellules malignes ne sont pas si facilement visibles ou leur présence est trop douteuse pour appeler cela un rapport positif. L’utilisation de techniques immuno-cytochimiques augmente la précision du diagnostic dans ces cas.
Ghosh, Mason et Spriggs ont analysé 53 échantillons de liquide pleural ou péritonéal provenant de 41 patients atteints d’une maladie maligne. L’examen cytologique classique n’avait révélé aucune cellule néoplasique. Trois anticorps monoclonaux (anti-CEA, Ca 1 et HMFG-2) ont été utilisés pour rechercher des cellules malignes. Un marquage immunocytochimique a été effectué sur des frottis non colorés, conservés à -20 °C jusqu’à 18 mois. Douze des quarante et un cas dans lesquels une coloration immuno-cytochimique a été réalisée ont révélé des cellules malignes. Le résultat a représenté une augmentation de la précision diagnostique d’environ 20%. L’étude a conclu que chez les patients présentant une suspicion de maladie maligne, l’étiquetage immuno-cytochimique devrait être utilisé de manière routinière lors de l’examen des échantillons cytologiquement négatifs et a des implications importantes en ce qui concerne la prise en charge du patient.
Une autre application de coloration immuno-cytochimique est la détection de deux antigènes dans le même frottis. Une double coloration avec des anticorps à chaîne légère et avec des marqueurs de cellules T et B peut indiquer l’origine néoplasique d’un lymphome.
Une étude a rapporté l’isolement d’une lignée cellulaire d’hybridomes (clone 1E10), qui produit un anticorps monoclonal (IgM, isotype k). Cet anticorps monoclonal présente une coloration immuno-cytochimique spécifique des nucléoles.
Les tissus et les tumeurs peuvent être classés en fonction de leur expression de certains marqueurs, à l’aide d’anticorps monoclonaux. Ils aident à distinguer les lésions morphologiquement similaires et à déterminer l’origine des organes ou des tissus des métastases indifférenciées. Analyse immuno-cytologique de la moelle osseuse, des aspirations tissulaires, des ganglions lymphatiques, etc. avec des anticorps monoclonaux sélectionnés aident à la détection des métastases occultes. Les anticorps monoclonaux augmentent la sensibilité à la détection même de petites quantités de cellules invasives ou métastatiques. Les anticorps monoclonaux (MAB) spécifiques des cytokératines peuvent détecter des cellules tumorales épithéliales individuelles disséminées dans la moelle osseuse.