TUNELFESTÉS és a TUNEL-vizsgálat

Gao Y et al. használt HRP-DAB TUNEL assay kit ab206386 elemzésére szöveti szakaszok egér petefészkek. a.A DNAse I-vel kezelt szakasz pozitív kontrollként. B. negatív kontroll TdT enzim nélkül. C és f. reprezentatív kísérleti képek. A TUNEL-vizsgálattal festett magok barnák. A szekciókat Metilzöld színnel festették.

a tunel festési módszerek előnyei és hátrányai

A Tunel festési / TUNEL vizsgálati protokollok, amelyek közvetlenül fluoreszcens festékkel jelölt nukleotidot használnak, gyorsabbak, mint az indirekt módszerek, amelyek antitestet vagy sztreptavidin-biotin komplexet használnak, mivel kevesebb festési lépést igényelnek.

a biotinnal jelölt nukleotidokra támaszkodó módszerek részesülhetnek a streptavidin-biotin komplex amplifikációjából. További blokkoló lépéseket igényelnek az endogén biotin semlegesítésére és a háttérfestés csökkentésére, bár ezek közösek minden hagyományos kromogén immunhisztokémiát futtató kutató számára.

A BrdU-alapú módszerek fényesebb jelet is előállíthatnak, mivel a BrdU-t általában könnyebben beépíti a TdT enzim.

a tunelfestés/TUNEL vizsgálati módszerek relatív népszerűsége

50 kutatási cikk felmérése, amelyet 2017-ben tettek közzé, amely a “TUNEL Assay” vagy a “TUNEL festés” kifejezést tartalmazta, kiderült, hogy:

– a felhasznált papírok 50% – a közvetlenül a fitc-hez konjugált dUTP

-15% használt biotin – dUTP és sztreptavidin-HRP

-15% használt FITC – dUTP és egy HRP-hez konjugált anti-FITC antitest

– 12% használt digoxigenin-dUTP, és egy fluoreszcens festékhez vagy HRP-hez konjugált anti-digoxigenin antitest 598>

– 8% használt br-dutp-ot és egy fluoreszcens festékhez konjugált anti-brdu antitestet

az összes megkérdezett tanulmány a Tunel-vizsgálatot alkalmazta képalkotásban, nem pedig áramlási citometriában. Ahol HRP-t használtak, DAB szubsztrátot adtak hozzá, hogy barna foltot hozzanak létre. A kutatási cikkek több mint 90% – a használt készletet a TUNEL festéshez.