VSV-ΔG-GFP Plasmid Expression Vector

Il plasmide pVSV-ΔG-GFP codifica l’RNA antigenomico-sense (o positivo-sense) di un virus della stomatite vescicolare ricombinante con restrizione di replicaton (rVSV) in cui il gene della glicoproteina (G) è stato sostituito con GFP. Questo plasmide è usato insieme ai plasmidi che codificano il nucleocapside di VSV (N), la fosfoproteina (P), la glicoproteina (G) e la grande subunità della polimerasi (L) al virus pseudotipizzato ΔG-GFP di recupero VSV-G come descritto in . L’RNA antigenomico di ΔG-GFP è espresso dal promotore del batteriofago T7 in pBS, che è stato ulteriormente modificato per contenere il ribozima delta dell’epatite utilizzato per generare un’estremità precisa 3′ dell’RNA antigenomico VSV e una sequenza di terminatore T7 clonata tra i siti di restrizione SacII e SacI in pBS-SK+ .

La stomatite vescicolare ricombinante viru-ΔG (rVSV-ΔG) è stata utilizzata per produrre pseudotipi di VSV contenenti le glicoproteine dell’involucro di virus eterologi, compresi i virus che richiedono un contenimento ad alto livello. Poiché l’infettività di rVSV-ΔG è limitata a un singolo ciclo di replicazione, le analisi dell’ingresso virale possono essere eseguite utilizzando solo il contenimento del livello di biosicurezza 2 (BSL-2).

È responsabilità dello sperimentatore principale richiedere l’approvazione del Comitato per la sicurezza della biosicurezza istituzionale per l’uso di DNA ricombinante, animali transgenici o agenti infettivi all’interno dei propri spazi di laboratorio e mantenere l’approvazione del Comitato per la sicurezza della biosicurezza istituzionale durante il periodo di tempo in cui questi materiali vengono utilizzati.

Dal laboratorio di Michael A. Whitt, Ph. D., Università del Tennessee.

Parte del programma Allegato dello sperimentatore.