目的

BY admin

| 7月 25, 2021

ラテックス凝集の技術を学ぶ。

ラテックス凝集は、特定の抗原（または抗体）を含む試料をラテックス粒子の表面にコーティングされた抗体（または抗原）と混合すると観察される。

乳液の膠着テストは感染症の検出のための臨床実験室で適用され、1956年に歌手およびPlotzは最初にRheumatoid要因テスト、乳液の膠着に基づくテストを記述した。関節リウマチ（RA）では、滑膜関節のリンパ球によって作り出されるIgGの抗体はIgMの抗体（RF、rheumatoid要因）と補体を活動化させ、ティッシュの破壊を引き起こす免疫 RAは診断的に重要です。

それ以来、微生物およびウイルス感染、自己免疫疾患、ホルモン、薬物および血清タンパク質を検出する試験が世界中の多くの企業によって開発され、主義は肝炎、h.influenzae、N.のmeningitidis、等のような多くの伝染を診断するために使用されます。. 抗原または抗体を検出または定量するすべての方法は、それらが反応して複合体を形成するという事実を利用する。最適な抗原-抗体濃度では、この複合体が析出する。しかしながら、抗原が本質的に粒子状である場合、抗原−抗体複合体の凝集が観察される。

凝集反応

粒子状抗原と抗体との間の反応は、凝集と呼ばれる目に見える凝集をもたらす。このような反応を産生する抗体は、凝集素として知られている。凝集反応の原理は沈殿反応に類似しており、それらは多価抗原の架橋に依存する。抗原が赤血球であるとき、それは赤血球凝集と呼ばれる。理論的には、すべての抗体は粒子状抗原を凝集させることができるが、その高い特異性のためにIgMは特に良好な凝集素である。＜6141＞＜7675＞抗体の濃度が高い（低希釈）と凝集が認められず、試料を希釈すると凝集が起こる。プロゾーン効果は、高濃度の抗体での凝集の不可視性として定義される。過剰な抗体が目に見える凝集を形成するために凝集しない非常に微細な複合体を形成する理由によるものである。

定性凝集試験

凝集試験は、抗原または抗体の存在をアッセイするために定性的な方法で使用することができる。抗体は、粒子状抗原と混合され、陽性試験は、粒子状抗原の凝集によって示される。

例えば、患者の血液型を決定するために、その人の赤血球を血液型抗原に対する抗体と混合することができる。別の例は、患者試料中の抗体の存在をアッセイするために、患者の血清を既知の血液型の赤血球（ＲＢＣ）と混合することである。

定量凝集試験

粒子状抗原に対する抗体のレベルを測定するために、凝集試験を広く使用することができる。この試験のために、試料の連続希釈を行うことができ、抗体について試験される。次いで、一定量の粒子状抗原または細菌または赤血球をそれに添加することができる。凝集を形成する最大希釈を決定し、観察可能な凝集を与えるこの最大希釈は力価として知られている。結果は、目に見える凝集を形成する最大希釈の逆数として示される。

受動的赤血球凝集

受動的ヘム凝集の技術により、凝集反応の感度と単純さを可溶性抗原に拡張することができる。この技術では、タンニン酸または塩化クロムで処理された赤血球と可溶性抗原を混合することによって抗原被覆赤血球を調製し、両方とも細胞表面への抗原の吸着を促進する。しかし、赤血球を可溶性抗原で被覆することは可能である（例えば、赤血球を被覆することは可能である）。. 抗原、多糖類またはハプテン）および可溶性抗原に対する抗体の凝集試験において被覆された赤血球を使用する。

抗体を含む連続希釈血清をマイクロタイタープレートの各ウェルに装填し、その後、各ウェルに抗原被覆赤血球を塗布する。ウェル上の凝集赤血球の特徴的なパターンは、凝集反応をアッセイするためのツールとして使用される。抗原が粒子状である場合、抗原は血清中の抗体と反応し、陽性の結果を示す抗原の凝集をもたらすことができる。

過去数年間、赤血球からラテックスビーズなどの合成粒子への移行がありました。調製物は、すぐに使用するか、または後で使用するために保存することができる。合成ビーズの使用は、一貫性、均一性、および安定性の利点を提供する。さらに、合成ビーズを用いた凝集反応は、迅速に、しばしば、ビーズを試験試料と混合してから３〜５分以内に読み取ることができる。赤血球またはより便利で、より多目的な総合的なビードに基づいてかどうか、膠着の反作用は実行しやすく、高い装置を要求しないし、少量の抗体（ミリリ

試験の最初のステップは、粒子の表面上の抗原決定基に特異的に結合する抗体分子によるラテックス粒子の連結である。これらの相互リンクを介して大きな格子の形成があり、これらの大きな格子は塊の大きさが大きいために容易に堆積し、数分以内に肉眼で見える。凝集の程度は、ベル状の曲線を与える攻撃性の濃度をプロットすることによって決定することができる。抗原−抗体複合体は、ラテックス粒子を使用して拡大することができる。ラテックス凝集試験の多くは、手動で行われ、目視観察によって検出される。凝集を決定するには、約100個の塊が含まれていなければならず、これらの塊は目で見るためには約50マイクロメートルの大きさでなければならない。

凝集抑制反応

ラテックスと混合する前に抗体を抗原とインキュベートすると、凝集が阻害されます。凝集阻害において、凝集の不在は抗原の診断であり、少量の抗原に対して高感度なアッセイを提供する。例えば家の妊娠のキットはHCGに人間の絨毛性ゴナドトロピン（HCGのホルモン）によって塗られる乳液の粒子および抗体を含んでいます。妊娠中の女性の尿は受精の後で成長の胎盤によって分泌するHCGを含んでいます。 HCGを含んでいる尿の付加は反HCGの抗体が加えられるとき乳液の粒子の膠着を禁じます;そしてこうして妊娠は膠着の不在によって示されます。

ラテックス粒子

乳化重合は、ラテックス粒子の調製に適用される手順である。まず、スチレンを界面活性剤（ドデシル硫酸ナトリウム）溶液と混合し、均一な直径にある数十億の乳化ミセルを形成する。次に、水溶性重合開始剤である過硫酸カリウムを少量添加する。重合プロセスが終了すると、ポリスチレン鎖がミセルに配置される。ポリスチレン鎖の炭化水素部分は中心に付着し、末端硫酸イオンは水相に曝される球表面に付着する。他の炭化水素およびその誘導体は、均一なラテックス粒子の製造にも使用され、例のいくつかは、ストリレン-dlvinylbenzene、ポリメタクリル酸メチル、スチレンビニルトルエン、ポリビルトルエンなどである。

ラテックス粒子の製造プロセスは合成ゴムの製造から進化しており、乳剤も乳白色の外観を持ち、ラテックスという用語が与えられています。ラテックス粒子の所望の直径は、調製プロセス、炭化水素、界面活性剤および開始剤を変更することによって作製することができる。ラテックスの粒径は、通常、0.05μ mから2μ mの範囲である。粒子に固有の否定的な表面充満を提供する粒子の表面の硫酸塩およびスルホン酸塩イオンの存在のために。

ラテックス粒子は、結合安定性を促進し、分析物の付着を増加させるために、官能化および表面処理することができる。アミド化、アミノ化、カルボキシル化、ヒドロキシル化、さらには磁化などの機能的処理は、ラテックス粒子の特性を高めるために使用されます。また視覚読み出しを促進する乳液の粒子のさまざまな色は商業的に利用できます。

ラテックス凝集試験は、血液、唾液、尿、脳脊髄液などの様々な体液中の特定の抗原または抗体を検出する臨床方法です。テストされるべきサンプルは実験室に特定の抗原か抗体が塗られる乳液のビードと混合したところで送られ。ラテックスビーズの凝集（凝集）は、疑わしい粒子の存在を示す。

ラテックス凝集試験にはいくつかの利点があります。彼らは,

1. 半定量的な結果を得る能力。
2. 低い個々のテスト費用。
3. 結果を得るための比較的短い時間。

試料の2倍から10倍の希釈を行うことにより、半定量的な結果を得ることができます。乳液の膠着テストに下記のものを含んでいるある不利な点がまたあります

1.と
2を慎重に解釈する必要があります。多くの試金の干渉の物質による特定性の問題。