Giemsa Stain-原理、手順、結果、解釈

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最終更新日2020年2月5日By Sagar Aryal

はじめに

ギムザ染色は、マラリアの寄生虫の存在を実証するための試薬の組み合わせの彼の適用のために、ドイツの化学者の科学者から採用された名前でした。

それはRomanowsky汚れとして知られている汚れのグループに属しています。 これらは酸化されたメチレンブルー、紺碧およびEosin Yの混合物から成っている中立汚れであり、メタノールと後固定される空気乾燥されたスライドで行った。 Romanowskyの汚れは細胞の微分、血および骨髄のフィルムのようなサンプルの病理学の検査および寄生虫の例えばマラリアのデモンストレーションで適用される。 Romanoswskyの汚れには四つのタイプがあります:

  • ギムザ染色
  • ジェンナー染色
  • ライト染色
  • メイ-グルンワルド染色
  • リーシュマン染色

ギムザ染色の目的

  • 血球を染色して同定するため
  • 血球核を細胞質から分化させるため

原理

Giemsaの汚れはマラリア寄生虫のための血を検査するのに薄く、厚い塗抹標本のために使用されている金本位の汚損の技術のための定期的な検査です 他の血液寄生虫および形態学的に赤血球、白血球および血小板および寄生虫の核および細胞質を区別する。

Romanowsky染色の他のタイプと同様に、血液細胞の酸性度と塩基性の親和性に関連して、酸性染料と塩基性染料の両方で構成されています。 紺碧およびメチレンブルーは酸の核心に、塩基性染料結合し青紫色色を作り出します。 エオシンは酸性染料であり、アルカリを産生する赤色の着色である細胞質および細胞質顆粒に引き寄せられる。 汚れはpH6.8か7.に水と緩衝されなければなりません。2、簡単な材料を結合するために染料を沈殿させるため。

古典的に、Giemsaの汚れは診断のために細胞遺伝学および組織病理学で広く使用される試薬（紺碧、メチレンブルーおよびEosinの染料）の組合せから成っている差:

  1. マラリア、スピロヘータおよびその他の血液寄生虫
  2. クラミジアトラコマティス封入体
  3. ボレリア属
  4. ペスティス属
  5. ヒストプラズマ属
  6. ニューモシスティス属
  7. ニューモシスティス属

  • メタノール
  • ギムザパウダー
  • グリセリン
  • 水（緩衝液)

手順

ギムザ染色原液（500ml）の調製)

  1. メタノールの250mlに、Giemsaの粉の3.8gを加え、分解して下さい。
  2. 溶液を60℃まで加熱してから、溶液に250mlのグリセリンをゆっくり加えます。
  3. 溶液をろ過し、使用前に約1-2ヶ月放置する。

作業溶液の調製

  1. 蒸留水80mlとメタノール10mlに原液10mlを加える

染色手順1：薄膜染色

  1. きれいな乾燥した顕微鏡のガラススライドで、標本（血）の薄膜を作り、乾燥した空気に残して下さい。
  2. スミア（2-3ディップ）を純粋なメタノールに浸してスミアを固定し、30秒間空気乾燥させておきます
  3. スライドに5％Giemsa染色液を20-30分間洪水させます。
  4. 水道水で洗い流し、乾燥させておきます

注：緊急の場合は、Giemsa染色液を5-10分間放置しておきます

染色手順2：厚膜染色

  1. 血液の厚い塗抹標本を加え、染色ラック上で1時間乾燥させる。
  2. 厚い血液塗抹標本を希釈したGiemsa染色（原液1mlを採取し、49mlのリン酸緩衝液または蒸留水に添加することによって調製されるが、結果は異なる場合がある）に浸した。
  3. 蒸留水の緩衝水に3-5分間浸漬して塗抹標本を洗浄する
  4. 乾燥させたまま

結果

血球の細胞質および細胞質顆粒は赤色に見え、核は青紫色に見える。

赤血球はclourでピンクに見えます

  • 好酸球は青紫色の核、淡いピンクの細胞質、および橙赤色の顆粒を持っています。
  • 好中球は紫赤色の核とピンク色の細胞質に見えます。
  • 好塩基球には紫色の核と青みがかった顆粒があります。
  • リンパ球は濃い青色の核と薄い青色の細胞質を持っています。
  • 単球には紫色の核とピンク色の細胞質があります。

ギムサ染色-原理、手順、結果、解釈

画像ソース：Wikipedia

解釈

紺碧とメチレンブルーは、塩基性染料が酸核に結合して青紫色を生成する。 エオシンは酸性染料であり、細胞質および細胞質顆粒に引き寄せられ、アルカリ性を産生する赤橙色の着色である。

用途Giemsa染色

  1. Giemsa染色はDNAのリン酸基に特異的です。 それはアデニン-チミンの結合の多量のDNAの領域にそれ自身を付けます。
  2. Giemsa染色は、染色体を染色するためにGiemsaバンディング（Gバンディング）で使用され、染色体の図式表現（idiogram）を作成するためによく使用されます。
  3. 差動染色であるため、Giemsa染色を使用して、病原菌のヒト細胞への付着を研究し、ヒト細胞を紫色として、細菌細胞をピンク色として区別することがで
  4. マラリアおよび一部のスピロヘータおよび原生動物の血液寄生虫の病理組織学的診断に使用できます。
  5. それはWolbachのティッシュの汚れiでも使用されます。e造血組織を染色し、細菌およびリケッチアの同定のための
  6. Giemsa染色は、末梢血塗抹標本および骨髄標本のための古典的な血液膜染色である。 赤血球はピンクに染まり、血小板は淡いピンクに染まり、リンパ球の細胞質はスカイブルーに染まり、単球の細胞質は淡いブルーに染まり、白血球の核クロマチンはマゼンタに染まります。
  7. Giemsa染色は、染色体を視覚化し、転座や再配列などの染色体異常を識別するためにも使用され、
  8. Giemsaは真菌のヒストプラズマ、クラミジア細菌を染色し、肥満細胞を識別するために使用することができます。

利点

  • 容易に入手でき、準備、維持、使用が容易

制限

  • 作業用ギムザステインは、使用直前に準備する必要があります。
  1. Vetstream
  2. ; Hematology Practicals/Giemsa染色技術
  3. Romanowsky染色がどのように機能し、なぜそれらが貴重なままであるか–提案された普遍的なRomanowsky染色メカニズムとHorobin RWによる合理的なトラブルシューテ
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