Northern blot

northern blotは、RNAの混合物の中から特定のRNA分子を検出するために使用される実験室法です。 ノーザンブロッティングは、部分的遺伝子のRNA発現を測定するために、部分的な組織または細胞型からのRNAのサンプルを分析するために使用され得る。 この方法は、その技術との類似性のために命名されたサザンブロットとして知られている。

ノーザンブロットの最初のステップは、サンプル内のRNAを一本鎖に変性または分離することであり、鎖が展開され、鎖間に結合がないことを保証する。 RNA分子は、ゲル電気泳動と呼ばれる方法を使用して、それらのサイズに応じて分離される。 続いて、RNAはゲルからブロッティング膜に転写される。(このステップは、技術に名前を与えるものであるが、”ノーザンブロッティング、”用語は、通常、全体の手順を記述するために使用されます。)Transferisが完了すれば、しみの膜はゲルのRNAバンドすべてを最初に運びます。 次に、膜はサンプルのaparticular RNA順序に補足である順序があるように設計されていたDNAかRNA calledaの調査の小さい部分と扱われます;これは調査が膜の特定のRNAの片に、orbind、ハイブリダイズするようにします。 さらに、プローブは、典型的には放射性原子または蛍光色素である標識を有する。 したがって、ハイブリダイゼーションの後、プローブは、関心のあるRNA分子を膜上の多くの異なるRNA分子の中から検出することを可能にする。