TUNEL染色およびTUNELアッセイ

Gao Y et al. hrp-DAB TUNEL assay kit ab206386を使用して、マウス卵巣からの組織切片を分析しました。 A.陽性対照としてDNase Iで処理した部分。 B.TdTの酵素のない否定的な制御。 cおよびf.代表的な実験画像。 TUNELアッセイで染色された核は茶色である。 切片はメチルグリーンで対比染色した。

TUNEL染色法の利点と欠点

tunel染色/tunelアッセイ蛍光色素で直接タグ付けされたヌクレオチドを使用するプロトコルは、抗体またはストレプトアビジン-ビオチ

ビオチンタグ付きヌクレオチドに依存する方法は、ストレプトアビジン-ビオチン複合体の増幅の恩恵を受けることができます。 これらは、伝統的な発色性免疫組織化学を実行しているすべての研究者に共通しているが、それらは、内因性ビオチンを中和し、背景染色を減少させる

BrdUベースの方法は、BrdUが典型的にはTdT酵素によってより容易に組み込まれるため、より明るい信号を生成することもできる。

TUNEL染色/TUNELアッセイ法の相対的な人気

用語”TUNELアッセイ”または”TUNEL染色”を含む50の研究論文の2017年に発表された調査では、ことを明らかにしました:

-50%の論文がDUTPをFITCに直接結合させた

-15%がビオチン-dUTPおよびストレプトアビジン-HRPを使用した

-15%がFITC-dUTPおよび抗FITC抗体をhrpに結合させた

-12%がジゴキシゲニン-dUTPを使用し、抗ジゴキシゲニン抗体を蛍光色素またはhrpに結合させた

-12%がジゴキシゲニン抗体を使用した。598>

-8％がbr-dutpと蛍光色素に結合した抗brdu抗体を使用しました

調査されたすべての論文は、フローサイトメトリーではなく、イメージングでtunelアッセイを使用し ＨＲＰを使用した場合、ｄａｂ基質を添加して茶色の染色を生じさせた。 研究論文の90％以上がTUNEL染色のためのキットを使用していました。