목표
라텍스 응집 기술을 배웁니다.
라텍스 응집 특정 항원(또는 항체)을 포함하는 샘플이 라텍스 입자의 표면에 코팅 된 항체(또는 항원)와 혼합 될 때 관찰된다.
라텍스 응집 테스트는 감염성 질환의 검출을위한 임상 실험실에서 적용되었으며,1956 년 싱어와 플로츠 먼저 류마티스 인자 테스트,라텍스 응집을 기반으로 테스트를 설명했다. 류마티스 관절염에서는 활액 관절에서 림프구에 의해 생성 된 면역 항체가 면역 항체(류마티스 인자,류마티스 인자)와 반응하여 보체를 활성화시키고 조직 파괴를 일으키는 면역 복합체를 생성합니다. 라 진단 중요성 이다.
그 이후로 미생물 및 바이러스 감염,자가 면역 질환,호르몬,약물 및 혈청 단백질을 검출하기위한 테스트가 전 세계 많은 회사에서 개발 및 판매되었습니다. 이 원칙은 간염,인플루엔자,수막염 등과 같은 많은 감염을 진단하는 데 사용됩니다.. 항원 또는 항체를 검출 또는 정량화하는 모든 방법은 복합체를 형성하기 위해 반응한다는 사실을 이용합니다. 최적의 항원-항체 농도에서이 복합체가 침전됩니다. 그러나,항원이 본질적으로 미립자 인 경우,항원-항체 복합체의 응집이 관찰된다.
응집 반응
미립자 항원과 항체 사이의 반응은 응집 이라고 불리는 가시적 인 응집을 초래합니다. 이러한 반응을 일으키는 항체는 응집소로 알려져 있습니다. 응집 반응의 원리는 침전 반응과 유사하다;그들은 다가 항원의 교차 연결에 의존한다. 항원이 적혈구 일 때 그것은 혈액 응집.이론적으로 모든 항체는 미립자 항원을 응집 할 수 있지만 특이성이 높기 때문에 특히 우수한 응집체입니다.
항체의 농도가 높을 때 응집이 관찰 될 수 없으며(낮은 희석)시료가 희석되면 응집이 발생합니다. 프로존 효과는 높은 농도의 항체에서의 응집의 투명성으로 정의됩니다. 그것은 과잉 항체가 눈에 보이는 응집을 형성하기 위하여 응집하지 않는 작은 복합물을 아주 형성하다 이유 때문이.
정성 응집 시험
응집 시험은 항원 또는 항체의 존재를 분석하기 위해 정성적인 방식으로 사용될 수 있다. 상기 항체는 미립자 항원과 혼합되고,상기 미립자 항원의 응집에 의해 양성 시험이 지시된다.
예를 들면,환자의 혈액형을 결정하기 위하여 사람의 적혈구는 혈액형 항원에 항체와 혼합될 수 있다. 또 다른 예는 환자 샘플에서 항체의 존재를 분석하기 위해 환자의 혈청을 알려진 혈액형의 적혈구와 혼합하는 것입니다.
정량 응집 시험
미립자 항원에 대한 항체 수준을 측정하기 위해 응집 시험을 널리 사용할 수 있습니다. 이 시험을 위해,견본의 연속되는 희석은 할 수 있고 항체를 위해 시험됩니다. 그런 다음 고정 된 양의 미립자 항원 또는 박테리아 또는 적혈구를 첨가 할 수 있습니다. 응집을 형성하는 최대 희석을 결정하고 관찰 가능한 응집을 제공하는이 최대 희석을 역가로 알려져 있습니다. 결과는 보이는 응집을 형성하는 최대 희석의 역수로 표시됩니다.
수동 헴 응집
응집 반응의 민감도 및 단순성은 수동 헴 응집 기술에 의해 가용성 항원으로 확장 될 수있다. 이 기술에서,항원 코팅 적혈구는 용해성 항원과 탄닌산 또는 염화 크롬으로 처리 된 적혈구를 혼합하여 제조되며,둘 다 항원의 세포 표면으로의 흡착을 촉진한다. 그러나 적혈구를 용해성 항원으로 코팅 할 수 있습니다(예:. 바이러스성 항원,다당류 또는 합텐)및 용해성 항원에 대한 항체에 대한 응집 시험에서 코팅 된 적혈구를 사용한다.
항체를 포함하는 순차적으로 희석된 혈청을 마이크로타이터 플레이트의 각 웰에 적재하고,그 후 항원 코팅된 적혈구를 각 웰에 도포한다. 우물에 응집 된 적혈구의 특징적인 패턴은 응집 반응을 분석하기위한 도구로 사용됩니다. 항원이 미립자인 경우에,항원은 긍정적인 결과를 보여주는 항원의 응집 혈청 및 결과에 있는 항체로 반작용할 수 있습니다.
지난 몇 년 동안 적혈구에서 라텍스 구슬과 같은 합성 입자로 이동했습니다. 준비는 즉시 사용하거나 나중에 사용하기 위해 저장할 수 있습니다. 합성 구슬의 사용은 견실함,균등성 및 안정성의 이점을 제안합니다. 또한,합성 비드를 사용하는 응집 반응은 종종 비드와 테스트 샘플을 혼합 한 후 3~5 분 이내에 빠르게 읽을 수 있습니다. 적혈구 또는보다 편리하고 다양한 합성 구슬을 기반으로하든,응집 반응은 수행하기 쉽고,값 비싼 장비를 필요로하지 않으며,소량의 항체(밀리리터 당 나노 그램 정도의 낮은 농도)를 검출합니다.
시험에 있는 처음 단계는 입자의 표면에 항원 결정인자에 특히 붙이는 항체 분자에 의하여 유액 입자의 함께 연결입니다. 이 교차 링크를 통해 큰 격자의 형성이 있고 덩어리의 큰 크기로 인해 이러한 큰 격자는 쉽게 침전되며 몇 분 안에 육안으로 볼 수 있습니다. 응집 정도는 종 모양의 곡선을 제공하는 응집 농도를 플로팅하여 결정할 수 있습니다. 항원-항체 복합체는 라텍스 입자를 사용하여 확대 될 수 있습니다. 많은 라텍스 응집 테스트는 수동으로 수행되며 육안 관찰에 의해 감지됩니다. 응집을 결정하기 위해서는 약 100 개의 덩어리가 있어야하며,이 덩어리는 눈으로 볼 수있는 약 50 마이크로 미터 크기 여야합니다.
응집 억제 반응
항체가 라텍스와 혼합하기 전에 항원과 함께 배양되면,응집이 억제된다;이는 유리 항체가 응집을 위해 이용 가능하지 않기 때문이다. 응집 금지에서는,응집 결핍은 항원의 진단,제공합니다 항원의 소량을 높은 과민한 분석실험을 입니다. 예를 들어 가정용 임신 키트에는 인간 융모 성 성선 자극 호르몬이 포함되어 있습니다. 임신 한 여성의 소변은 수정 후 개발 태반에 의해 분비되는 홍 반성 포도상 구균을 포함. 추가의 소변을 포함하는 HCG,을 억제 응집의 라텍스 입자를 때 anti-HCG antibody 이 추가됩니다;따라서 임신은 나의 부재에 의해 agglutination.
라텍스 입자
에멀젼 중합은 라텍스 입자의 제조에 적용되는 절차이다. 첫째로 스티렌은 계면활성제(나트륨 도데실 황산염)해결책과 섞이고,획일한 직경에 있는 에멀션화한 미셀의 10 억을 형성합니다. 그런 다음 물 용해성 중합 개시제 인 과 황산칼륨의 작은 양을 첨가한다. 중합 공정이 완료되면 폴리스티렌 체인이 미셀에 배열됩니다. 폴리스티렌 사슬의 탄화수소 부속은 물 단계에 드러내는 구체 표면에 센터 및 끝 황산염 이온에 붙어 있습니다. 다른 탄화수소 및 그 유도체는 또한 균일 한 라텍스 입자의 제조에 사용되며,일부 예는 스트리 렌-들 비닐 벤젠,폴리 메틸 메타 크릴 레이트,스티렌 비닐 톨루엔,폴리 비닐 톨루엔 등이다.
라텍스 입자 생산의 과정은 합성 고무 생산에서 진화 하 고 또한 에멀젼 유백색 외관,용어 라텍스 그것에 주어진다.라텍스 입자의 원하는 직경은 제조 공정,탄화수소,계면 활성제 및 개시제를 수정하여 만들 수 있습니다. 라텍스의 입자 크기는 일반적으로 0.05~2,000,000 사이의 범위입니다. 입자에 고유한 부정적인 지상 책임을 제공하는 입자의 표면에 황산염과 술포네이트 이온의 존재 때문에.
라텍스 입자는 결합 안정성을 촉진하고 분석물 부착을 증가시키기 위해 기능화되고 표면 처리 될 수있다. 아미드 화,아민 화,카르 복실 화,하이드 록 실화 및 심지어 자화와 같은 기능적 처리는 라텍스 입자의 특성을 증가시키는 데 사용됩니다. 또한 라텍스 입자의 다양한 색상을 상업적으로 사용할 수있어 시각적 판독을 용이하게합니다.
라텍스 응집 검사는 혈액,타액,소변 또는 뇌척수액과 같은 다양한 체액에서 특정 항원 또는 항체를 검출하는 임상 방법입니다. 시험될 견본은 특정 항원 또는 항체로 입힌 유액 구슬과 섞인 곳에 실험실에 보내지고. 라텍스 비드의 응집(응집)은 의심되는 입자의 존재를 나타냅니다.
라텍스 응집 테스트에는 몇 가지 장점이 있습니다.그들은,
1. 반 정량적 결과를 얻을 수있는 능력.
2. 낮은 개별 테스트 비용.
3. 결과를 얻는 비교적 짧은 시간.
표본의 2~10 배 희석을 수행하면 반 정량적 결과를 얻을 수 있습니다.라텍스 응집 테스트에는 다음과 같은 몇 가지 단점이 있습니다
1.한계 결과를 신중하게 해석하고
2. 많은 분석실험에 있는 방해 물질 때문에 특이성에 대한 문제.