장구균 및 연쇄상구균의 추정 식별을 위한 담즙-에스쿨린 검사:담즙 농도,접종 기술 및 배양 시간의 효과

장구균과 같은 쌍 및 사슬에서 카탈라아제 음성,알파 용혈성 및 비 용혈성 그람 양성 구균의 인식 및 분화;그룹 디 연쇄상 구균(주성 스트렙토 코커스 보비스);및 비 그룹 디 비리 단스 그룹 연쇄상 구균은 임상 적으로 중요합니다(10). 담즙-에스 쿨린 검사는 담즙에서 잘 자라지 않는 비 그룹 디 비리 단스 그룹 연쇄상 구균에서 담즙 내성이 있고 에스 쿨린으로 에스 쿨린을 가수 분해 할 수있는 장구균 및 그룹 디 연쇄상 구균을 구별하는 데 널리 사용됩니다. 1926 년 마이어와 숀펠드(8)에 의해 처음 기술된 담즙-에스쿨린 검사는 팩클램과 무디(2,3,5)에 의해 장구균과 그룹 디 연쇄상구균을 식별하기 위한 민감도가 100%이고 특이도가 97%인 것으로 나타났다. 이러한 결과는 4%옥스 갈(담즙 염)을 함유 한 한천 경사,24 시간 토드-휴이트 두 배양액(“다음날”접종)을 1 또는 2 방울 접종하고 48 시간 동안 배양하여 얻은 것입니다 일상적인 진단 세균학에서 이러한 프로토콜은 1 차 플레이트에서 콜로니가 검출 된 지 3 일이 필요하기 때문에 실용적이지 않습니다. 대부분의 교과서 및 절차 매뉴얼은 국물의 24 시간 하위 문화가 아닌 몇 개의 식민지(“당일”접종)에서 직접 한천 경사를 접종하는 것이 좋지만이 표준화되지 않은 대체 기술을 지원하는 데이터는 부족합니다.

따라서 우리는 당일 접종(표준화 및 비 표준화됨)과 두 가지 다른 배양 시간(24 및 48 시간)의 두 가지 다른 방법으로 담즙-에스 쿨린 검사의 민감도와 특이성을 평가했습니다. 우리는 또한 미국에서 두 가지 주요 상업 소스에서 현재 사용할 수있는 제형에 2 및 4%옥스 갈을 포함하는 에스 쿨린 경사를 비교했습니다.

카탈라아제 음성,그람 양성 구균은 5%양의 혈액 한천에서 알파 용혈성 또는 비 용혈성 콜로니를 형성하는 쌍 및 사슬로 구성되어 있으며,이는 파이어에 대해 양성이었으며(영국 다트포드 주 뮤렉스),6.5%의 나클린산을 함유한 트립식성 대두 육수에서 성장하였다(벡턴 디킨슨 미생물학 시스템,코키스빌,메릴랜드). 이 경우,장구균은 장구균으로 확인되었다;그들은 장구균으로 확인되었다;그들은 빠른 연쇄상 구균 시스템(생체 제제,헤이즐 우드,미주리 주)과 함께 분류되었다.). 2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 카탈라아제 음성,그람 양성 구균 쌍 및 사슬을 형성하는 알파 용혈성 또는 비 용혈성 콜로니 이는 파이르 및 그룹 항원에 대해 음성이었고(알파 용혈성 인 경우 담즙에 불용성 임)비리 단스 그룹 연쇄상 구균이라고 불렀습니다.2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 12 월 1 일,2013 년 이 균주는 메이요 클리닉에서 얻은 19 개의 보비 스트 레인을 제외하고 4 년 동안 듀크 대학교 의료 센터에서 수행 된 혈액 배양에서 연속적으로 분리되었습니다.1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년 10 월 15 일,1999 년). 옥스갈을 제외하고,세 매체의 구성은 동일했다. 각 배지에 대해 다음 두 가지 접종 기술이 사용되었습니다:(1)1 내지 10 콜로니의 비표준화 된 에스-모양 접종 및(2)10 의 간접,표준화 된 접종 0.5 맥팔랜드 표준 현탁액의 0.5 맥팔랜드 표준 현탁액 멸균 탈 이온수 물. 판독 24 및 48 시간에 촬영 했다.

한 가지 예외를 제외하고,110 개의 모든 장구균 균주는 24 시간 및 48 시간의 배양(99%민감도)후에 명확한 양성 반응을 보였다. 표준화된 접종물(약 106 종)은 더 무겁고 비표준화된 접종물만큼 민감했다. 한천 경사에 107 내지 108 의 접종물을 사용한 팩클램과 무디는 48 시간에 100%의 민감도를보고했지만 24 시간 배양 후 76(5)중 2 개와 157(3)중 6 개 중 장구균 균주가 담즙-에스 쿨린 음성(98%민감도)인 것으로 나타났습니다. 백조(13)는 흑화가 긍정적 인 결과로 간주되는 무거운 것과 한천 플레이트로 설명 된 비 표준 접종 물을 사용하여 121 개의 장구균 균주로 24 시간에 100%의 감도를 얻었습니다. 그럼에도 불구하고,패클램의 출판물을 기반으로,대부분의 교과서와 절차 매뉴얼은 부정적인 결과를보고하기 전에 48 시간 동안 인큐베이션을 권장합니다.

모든 30 균주의 담 즙 농도 또는 접종 방법(100%감도)에 관계 없이 24 및 48 시간에 양성 이었다. Facklam(3)의 감도 보고 94 100%24,48h 각각 37 그룹 D 연쇄상구균 균주.

표 1 은 110 개의 비-그룹 디 비리 단스 그룹 연쇄상 구균 균주에 대한 위양성 담즙-에스 쿨린 검사의 비율을 제공한다. 우리는 특이성(100%마이너스 위양성 퍼센트)이 최대(97%)로 표준화 된 접종 물이 4%옥스 갈을 함유 한 한천 경사에 줄무늬가 있고 24 시간 후에 읽음을 발견했습니다. 디 아세틸 락 티스 트레인. 접종 물의 표준화 부족,옥스 갈 농도 감소 2%,배양 시간 연장 48 시간으로 오 탐지 횟수가 최대 24%증가했습니다. 아 지드 나트륨과 담즙을 10%만 함유 한 선택적 에스 쿨린 한천을 사용한 이전 연구에서 비 그룹 비리 단스 그룹 연쇄상 구균과 양성 반응이 흔했습니다(6,11,12). 옥스갈이 2%함유된 매체의 사용에 관한 데이터는 이전에 발표되지 않았다. 우리의 결과이 농도 차선책 것이 좋습니다. 4%옥스갈을 사용하여,스완(13)은 21 개의 분리물 중 2 개의 담즙 내성 비리단스 그룹 연쇄상구균 균주를 발견했다;그러나 어느 균주도 24 시간에 에스쿨린을 가수분해하지 않았다. 24 시간(3)에서 99%,81(4)에서 48 시간(3)에서 97%의 특이성을보고 4%옥스 갈.

눈에 띄는 차이 알파 용혈성 및 비 용혈성 비-그룹 디 비리 단스 그룹 연쇄상 구균의 하위 그룹이 가양 성의 수에 대해 비교되었을 때 발견되었습니다. 알파-용혈성 균주의 경우,이 수치는 24 시간 후 0%,48 시간 후 3%였고,비 용혈성 균주의 경우 24 시간 후 11%,48 시간 후 33%였고,4%옥스 갈 및 표준화 된 접종 물(피=24 시간 값에 대해 0.017;양꼬리 어부의 정확한 테스트). 이러한 관찰은 이전에보고되지 않았습니다.

혈액 및 일반적으로 멸균 부위 이외의 표본의 경우,담즙-에스 쿨린 검사를 기반으로 한 순서도 6.5%나클 내성 또는 파이르의 존재와 결합하면 장구균의 신뢰성있는 식별에 충분합니다. 혈액 및 일반적으로 멸균 부위에서 담즙-에스 쿨린 양성 유기체를 분류해야합니다. 장구균의 종 분화는 역학적 인 이유와 페시 움 및 다른 종은 페 칼리 스보다 항생제에 더 내성이있는 경향이 있기 때문에 유용합니다(8,9). 최종 식별. 보비스는 중요하다,유기체는 결장 암종과 연관되어 있기 때문에,이러한 환자에서 배제되어야한다(7). 다른 한편으로,거짓 긍정적 인 보고서. 보비스는 불필요한 조사로 이어질 수 있습니다. 담즙 에스 쿨린 양성 생물의 종 분화는 또한 위양성 비 그룹 디 비리 단스 그룹 연쇄상 구균의 검출을 허용합니다. 연쇄상 구균과 장구균의 오인으로 치료 오류가 발생할 수 있습니다(1). 장구균과 연쇄상 구균은 거의 위음성 반응을 일으키지 않기 때문에 담즙-에스 쿨린-음성 유기체의 일상적인 종 분화는 필요하지 않습니다.

결론적으로,담즙-에스 쿨린 검사는 장구균과 그룹 디 연쇄상 구균을 비-그룹 디 비리 단스 그룹 연쇄상 구균과 저렴한 비용으로 우수한 감도(>99%)및 특이성(97%)으로 신속하게 분리하는 데 잘 작동합니다..