Hybridomteknologi
bruk av monoklonale antistoffer er mange og inkluderer forebygging, diagnose og behandling av sykdom. For eksempel kan monoklonale antistoffer skille undergrupper Av B-celler og T-celler, noe som er nyttig for å identifisere forskjellige typer leukemier. I tillegg har spesifikke monoklonale antistoffer blitt brukt til å definere celleoverflatemarkører på hvite blodlegemer og andre celletyper. Dette førte til klyngen av differensieringsserier av markører. DISSE kalles OFTE CD-markører og definerer flere hundre forskjellige celleoverflatekomponenter av celler, hver spesifisert ved binding av et bestemt monoklonalt antistoff. Slike antistoffer er ekstremt nyttige for fluorescensaktivert cellesortering, den spesifikke isoleringen av bestemte typer celler.
i diagnostisk histopatologirediger
ved hjelp av monoklonale antistoffer kan vev og organer klassifiseres basert på deres uttrykk for bestemte definerte markører, som reflekterer vev eller cellulær genese. Prostataspesifikt antigen, alkalisk fosfatase i placenta, humant choriongonadotropin, α-fetoprotein og andre er organassosierte antigener, og produksjonen av monoklonale antistoffer mot disse antigenene bidrar til å bestemme arten av en primær tumor.
Monoklonale antistoffer er spesielt nyttige ved å skille morfologisk lignende lesjoner, som pleural og peritoneal mesotheliom, adenokarsinom, og ved bestemmelse av organ – eller vevsopprinnelse av utifferentierte metastaser. Utvalgte monoklonale antistoffer bidrar til påvisning av okkulte metastaser (kreft av ukjent primær opprinnelse) ved immuncytologisk analyse av benmarg, andre vevsaspirater, samt lymfeknuter og annet vev og kan ha økt følsomhet over normal histopatologisk farging.
En studie utførte en sensitiv immunhistokjemisk analyse på benmargsaspirater av 20 pasienter med lokalisert prostatakreft. Tre monoklonale antistoffer (T16, C26 og AE-1), som er i stand til å gjenkjenne membranantigener og cytoskeletale antigener uttrykt av epitelceller for å oppdage tumorceller, ble brukt i analysen. Benmargsaspirater hos 22% av pasientene med lokalisert prostatakreft (stadium B, 0/5; Stadium C, 2/4) og 36% av pasientene med metastatisk prostatakreft (Stadium D1, 0/7 pasienter; Stadium D2, 4/4 pasienter) hadde antigen-positive celler i benmargen. Det ble konkludert med at immunhistokjemisk farging av benmargsaspirater er svært nyttig for å oppdage okkulte benmargsmetastaser hos pasienter med tilsynelatende lokalisert prostatakreft.
selv om immuncytokjemi ved bruk av tumorassosierte monoklonale antistoffer har ført til en forbedret evne til å oppdage okkulte brystkreftceller i benmargsaspirater og perifert blod, er det nødvendig med videre utvikling av denne metoden før den kan brukes rutinemessig. En stor ulempe ved immuncytokjemi er at bare tumorassosierte og ikke tumorspesifikke monoklonale antistoffer brukes, og som et resultat kan det oppstå noen kryssreaksjoner med normale celler.
for å effektivt stadium brystkreft og vurdere effekten av renseregimer før autolog stamcelleinfusjon, er det viktig å oppdage selv små mengder brystkreftceller. Immunhistokjemiske metoder er ideelle for dette formålet fordi de er enkle, følsomme og ganske spesifikke. Franklin et al. utført en sensitiv immuncytokjemisk analyse ved å bruke en kombinasjon av fire monoklonale antistoffer (260F9, 520C9, 317g5 og BrE-3) mot tumorcelleoverflateglykoproteiner for å identifisere brysttumorceller i benmarg og perifert blod. De konkluderte fra resultatene at immuno-cytokjemisk farging av benmarg og perifert blod er en sensitiv og enkel måte å oppdage og kvantifisere brystkreftceller.
en av hovedårsakene til metastatisk tilbakefall hos pasienter med solide tumorer er tidlig spredning av maligne celler. Bruk av monoklonale antistoffer (mAbs) som er spesifikke for cytokeratiner, kan identifisere disseminerte individuelle epitelceller i benmargen.
En studie rapporterer om å ha utviklet en immun-cytokjemisk prosedyre for samtidig merking av cytokeratin komponent nr. 18 (CK18) og prostata spesifikt antigen (PSA). Dette vil bidra til videre karakterisering av spredte individuelle epiteliale tumorceller hos pasienter med prostatakreft. De tolv kontroll aspirater fra pasienter med benign prostatahypertrofi viste negativ farging, som ytterligere støtter spesifisiteten AV CK18 i å oppdage epitel tumorceller i benmargen.
i de fleste tilfeller av ondartet sykdom komplisert av effusjon, kan neoplastiske celler lett gjenkjennes. Men i noen tilfeller er maligne celler ikke så lett å se, eller deres tilstedeværelse er for tvilsomt å kalle det en positiv rapport. Bruken av immun-cytokjemiske teknikker øker diagnostisk nøyaktighet i disse tilfellene.
Ghosh, Mason og Spriggs analyserte 53 prøver av pleural eller peritoneal væske fra 41 pasienter med ondartet sykdom. Konvensjonell cytologisk undersøkelse hadde ikke avdekket noen neoplastiske celler. Tre monoklonale antistoffer (anti-cea, Ca 1 og HMFG-2) ble brukt til å søke etter ondartede celler. Immunocytokjemisk merking ble utført på ikke-fargede flekker, som hadde blitt lagret ved -20 °C i opptil 18 måneder. Tolv av de førtien tilfeller der immuno-cytokjemisk farging ble utført, avslørte ondartede celler. Resultatet representerte en økning i diagnostisk nøyaktighet på ca 20%. Studien konkluderte med at hos pasienter med mistanke om malign sykdom, bør immun-cytokjemisk merking brukes rutinemessig ved undersøkelse av cytologisk negative prøver og har viktige implikasjoner med hensyn til pasientbehandling.
En annen anvendelse av immun-cytokjemisk farging er for påvisning av to antigener i samme smøre. Dobbeltfarging med lyskjede antistoffer og med t-og b-cellemarkører kan indikere neoplastisk opprinnelse av et lymfom.
En studie har rapportert isolering av en hybridomcellelinje (klon 1e10), som produserer et monoklonalt antistoff (IgM, k isotype). Dette monoklonale antistoffet viser spesifikk immuncytokjemisk farging av nukleoler.
Vev og svulster kan klassifiseres basert på deres ekspresjon av visse markører, ved hjelp av monoklonale antistoffer. De hjelper til med å skille morfologisk lignende lesjoner og ved å bestemme organ – eller vevsopprinnelsen til utifferentierte metastaser. Immuno-cytologisk analyse av benmarg, vev aspirater, lymfeknuter etc. med utvalgte monoklonale antistoffer bidrar til påvisning av okkulte metastaser. Monoklonale antistoffer øker følsomheten ved å oppdage selv små mengder invasive eller metastaserende celler. Monoklonale antistoffer (mAbs) som er spesifikke for cytokeratiner, kan detektere disseminerte individuelle epitelceller i benmargen.