Lipid Raft

5 Plasma Membran Domener Involvert I SOKE

Lipid flåte domener (LRDs) som er beriket i slike lipider kan tjene som plattformer for rekruttering OG forankring STIM1/kanal komplekser i cellen periferien. LRDs er biokjemisk distinkte plasmamembran lipid domener som er beriket i kolesterol, sfingolipider, PIP2, PIP3, OG viktige kalsium-signalerende proteinkomponenter(F. Eks Cav1, EGFRs, G-proteiner, Pmca pumper, Homer, Og PKC). SOKE har blitt foreslått å skje innenfor LRDs, som avbrudd av disse domenene demper SOKE. Avhengigheten AV TRPC1 – kanalfunksjonen på intakte Lrder har blitt vist i mange celletyper, SOM HSG-celler, c2c12 skjelettmyoblaster, polymorfonukleære nøytrofiler, endotelceller Og humane blodplater (Ong & Ambudkar, 2012). Ytterligere bevis for involvering AV LRD i montering av funksjonelle trpc1 kanaler ble levert av data som viser en økning i partisjonering AV TRPC1 i lipid flåter etter stimulering av celler og Ca2 + lagre uttømming (Lockwich et al., 2000; Pani et al., 2008). I samsvar med forslaget om AT STIM1 kan forankres til plasmamembranen via interaksjon med LRDs, øker partisjoneringen av STIM1 til LRD under aktivering av SOKE. Enda viktigere er coimmunoprecipitation AV TRPC1 + STIM1 oppnådd I LRD, men ikke i ikke-LRD, fraksjoner. Når disse domenene forstyrres, dempes partisjoneringen og coimmunoprecipitasjonen AV TRPC1 og STIM1, så vel som SOKE. DEN polybasiske halen AV STIM1 inneholder en konsensussekvens som potensielt kan formidle bindingen til PIP2 i plasmamembranen (Liou, Fivaz, Inoue, & Meyer, 2007). Dette har blitt bekreftet i eksperimenter som viser at sletting av polybasisk hale resulterer i tap av SOKE samt STIM1 puncta dannelse i er-plasmamembranen (PM) veikryss regioner. De nøyaktige interaksjonene MELLOM STIM1 og plasmamembranproteiner eller lipider er ennå ikke løst. Det er også uklart om andre stillasproteiner er involvert i å målrette STIM1-klyngene til bestemte plasmamembranregioner. Det er sannsynlig at disse regionene har spesifikke biokjemiske, strukturelle og romlige egenskaper siden ionekanaler og muligens andre effektorproteiner regulert av SOKE, som CaM og calcineurin, rekrutteres og reguleres innenfor dette domenet. Dermed må hastigheten og spesifisiteten til disse prosessene kontrolleres strengt.

Cav1, et kolesterolbindende protein som er lokalisert innenfor OG organiserer LRD, har blitt foreslått å være involvert i reguleringen av SOKE via Både Orai1 og TRPC1, og å tjene som stillas for rekruttering av ulike proteiner til Lrd. I Xenopus-oocytter resirkulerer Orai1 aktivt mellom det endosomale rommet og plasmamembranen. Etter cellestimulering blir Orai1 aktivt transportert til plasmamembranen fra endosomale rom. Et Antatt Cav1-bindingssted er tilstede I N-enden Av Orai1 og Cav1 har vist seg å spille en rolle i endocytose Av Orai1 under meiose (Yu, Sun, & Machaca, 2010). Mens det kreves videre studier for å definere LRDs rolle i modulerende Orai1-kanalfunksjon, viste En rekke studier publisert En rolle For Cav1 i reguleringen AV TRPC1 (Ong & Ambudkar, 2012; Pani & Singh, 2009). TRPC-kanaler har bevart Cav1-bindende domener som ligger innenfor N – og C-termini. Det N-terminale Cav1-bindingsmotivet (aa 322 og 349 AV TRPC) binder seg til stillasdomenet I Cav1 (aa 82 og 101). TRPC1 coimmunoprecipitates Med Cav1 I HSG (Lockwich et al., 2000) og endotelceller i lungearterien (Kwiatek et al., 2006). Videre tjener n-TRPC1/Cav1-interaksjonen til å stillasere TRPC1 i plasmamembranområdet og bestemmer dens påfølgende aktivering ved butikkdeplesjon. En samordnet rolle For Cav1 og STIM1 i reguleringen AV TRPC1 er vist. Den foreslåtte reguleringsmåten FOR TRPC1 er at i hvileceller er den tilstede i resirkuleringsendosomer. Cav1 interagerer med OG stillaser TRPC1 vesikler nær plasmamembranen. Dette stillaset representerer sannsynligvis en kort oppbevaring av kanalen på dette stedet. Herfra resirkulerer den enten tilbake til trafficking-banen, eller hvis butikkdeplesjon påbegynnes, rekrutteres kanalen til plasmamembranen, interagerer med STIM1 og aktiveres. ETTER er-Ca2 + butikkdeplesjon, translokerer STIM1 til periferien av cellene, interagerer Med Og aktiverer Orai1, Og Orai1-mediert Ca2 + tilstrømning driver innføring AV TRPC1 i plasmamembranen. ETTER innsetting, STIM1 porter OG aktiverer TRPC1. Bindingen AV STIM1 til TRPC1 induserer også dissosiasjon AV TRPC1 / Cav1-kompleks (Pani et al., 2009). Nåværende data tyder på AT STIM1 / TRPC1 danner et stabilt kompleks som bidrar til å beholde aktive TRPC1-kanaler i plasmamembranen. Påfylling av er-Ca2 + – butikkene fører til inaktivering av kanalen, på grunn av DISSOSIASJONEN AV STIM1 FRA TRPC1. PÅ dette punktet, TRPC1 kan assosiere Med Cav1 (Pani et al., 2009) eller, alternativt, det kan være endocytosed via en annen rute. Flere studier er nødvendig for å videre avgrense protein-protein-interaksjoner involvert I fremdriften AV TRPC1 gjennom de forskjellige trinnene som er involvert i aktiveringen (handel, innføring i plasmamembranen, stillas og aktivering av STIM1). Interessant, Homer-1 har blitt rapportert å binde TRPC1 kanal og lette rask montering AV TRPC1 / Homer / IP3R kompleks, etter påfylling AV ER-Ca2 + butikker (Worley et al., 2007). Hvordan Nøyaktig Homer-1, Cav1, STIM1 og IP3R regulerer trafficking OG funksjon AV TRPC1 i en enkelt celle har ennå ikke klarlagt. En annen interessant hypotese som må undersøkes nærmere, er forslaget om at rekruttering Av orai/TRPC / STIM1-komplekser i LRDs er nødvendig for butikkavhengig regulering, men at de samme kompleksene kan fungere som reseptor-opererte kanaler når de er lokalisert utenfor lipidflåter (Liao et al., 2009). Dermed har flere proteiner kapasitet til å kritisk påvirke TRPC-funksjoner. Om disse er allestedsnærværende i alle celletyper eller OM TRPC1–SOKE er regulert på en cellespesifikk måte, må det etableres.