Northern blot

en northernblot er en laboratoriemetode som brukes til å oppdage spesifikke RNA-molekyler blant amixture AV RNA. Northern blotting kan brukes til å analysere en prøve AV RNA fra apartikulært vev eller celletype for å måle rna-uttrykket avspesielle gener. Denne metoden ble oppkalt etter sin likhet med teknikkenkjent Som En Sørlig flekk.

Det Første trinnet i en nordlig flekk er å denaturere, eller skille, RNA innenfor prøven i enkeltstrenger, noe som sikrer at strengene utfoldes og at det ikke er noen binding mellom tråder. RNA-molekylene separeresi henhold til deres størrelser ved hjelp av en metode som kalles gelelektroforese. Følgerseparasjon overføres RNA fra gelen til en blottende membran.(Selv om dette trinnet er det som gir teknikken navnet «northern blotting», brukes begrepet vanligvis til å beskrive hele prosedyren.) Når overføringen er fullført, bærer blotting-membranen alle RNA-båndene opprinnelig på gelen. Deretter behandles membranen med ET lite STYKKE DNA eller RNA som kalles en sonde, som er designet for å ha en sekvens som er komplementær til apartikulær RNA-sekvens i prøven; dette gjør at sonden kan hybridisere, orbind, til et spesifikt RNA-fragment på membranen. I tillegg har sonden alabel, som vanligvis er et radioaktivt atom eller et fluorescerende fargestoff. Således, etter hybridisering, tillater sonden rna-molekylet av interesse å bli oppdaget blant de mange forskjellige RNA-molekylene på membranen.