TUNEL flekker OG TUNEL analysen
Gao Y et al. brukt HRP-DAB TUNEL assay kit ab206386 å analysere vev seksjoner fra mus eggstokkene. A. Seksjon behandlet Med DNase I som positiv kontroll. B. Negativ kontroll uten TdT-enzym. c og f. representative eksperimentelle bilder. Kjerner farget MED TUNEL-analysen er brune. Seksjoner ble counterstained Med Metyl Grønn.
Fordeler og ulemper MED TUNEL flekker metoder
TUNEL flekker / TUNEL analyseprotokoller som bruker et nukleotid direkte merket med en fluorescerende fargestoff er raskere enn indirekte metoder, som bruker enten et antistoff eller en streptavidin-biotin kompleks, som de krever mindre flekker trinn.
Metoder som er avhengige av biotin-merkede nukleotider kan dra nytte av forsterkningen av streptavidin-biotinkomplekset. De krever ytterligere blokkerende trinn for å nøytralisere endogen biotin og redusere bakgrunnsfarging, selv om disse er felles for alle forskere som kjører tradisjonell kromogen immunhistokjemi.
BrdU-baserte metoder kan også produsere et lysere signal som BrdU er vanligvis lettere innlemmet Av tdt enzymet.
den relative populariteten TIL TUNEL-farging / TUNEL-analysemetoder
en undersøkelse av 50 forskningsartikler publisert i 2017 som inneholder begrepet «TUNEL-Analyse «eller» TUNEL-Farging», viste at:
– 50% av papirene brukt dUTP direkte konjugert TIL FITC
– 15% brukt biotin-dUTP og streptavidin-HRP
– 15% brukt FITC-dUTP og et ANTI-FITC antistoff konjugert TIL HRP
– 12% brukt digoxygenin-dUTP, og et anti-digoxygenin antistoff konjugert til enten et fluorescerende fargestoff eller HRP
– 8% brukte br-dutp og et anti-brdu-ANTISTOFF KONJUGERT til et fluorescerende fargestoff
alle de undersøkte papirene brukte tunel-analysen I AVBILDNING I STEDET for flowcytometri. DER HRP ble brukt, BLE DAB-substrat tilsatt for å skape en brun flekk. Mer enn 90% av forskningspapirene brukte et sett FOR TUNELFARGING.