Hybridomatechnologie
het gebruik van monoklonale antilichamen is talrijk en omvat de preventie, diagnose en behandeling van de ziekte. Bijvoorbeeld, kunnen monoclonal antilichamen subsets van cellen van B en cellen van T onderscheiden, die in het identificeren van verschillende types van leukemias nuttig is. Bovendien zijn de specifieke monoclonal antilichamen gebruikt om tellers van de celoppervlakte op witte bloedcellen en andere celtypes te definiëren. Dit leidde tot de cluster van differentiatiereeks van markers. Deze worden vaak aangeduid als cd tellers en definiëren enkele honderden verschillende componenten van de celoppervlakte van cellen, elk gespecificeerd door binding van een bepaald monoclonal antilichaam. Dergelijke antilichamen zijn uiterst nuttig voor fluorescentie-geactiveerde cel sorteren, de specifieke isolatie van bepaalde soorten cellen.
in diagnostische histopathologiedit
met behulp van monoklonale antilichamen kunnen weefsels en organen worden geclassificeerd op basis van hun expressie van bepaalde gedefinieerde markers, die het weefsel of Cellulaire ontstaan weerspiegelen. Prostaatspecifiek antigeen, placenta alkalische fosfatase, humaan choriongonadotrofine, α-fetoproteïne en andere zijn orgaan-geassocieerde antigenen en de productie van monoklonale antilichamen tegen deze antigenen helpt bij het bepalen van de aard van een primaire tumor.
monoklonale antilichamen zijn met name nuttig bij het onderscheiden van morfologisch vergelijkbare laesies, zoals mesothelioom van de pleura en het peritoneaal buikvlies, adenocarcinoom, en bij het bepalen van de orgaan-of weefseloorsprong van ongedifferentieerde metastasen. Geselecteerde monoklonale antilichamen helpen bij de detectie van occulte metastasen (kanker van onbekende primaire oorsprong) door immuno-cytologische analyse van beenmerg, andere weefselaspiraten, evenals lymfeklieren en andere weefsels en kunnen een verhoogde gevoeligheid hebben voor normale histopathologische kleuring.
Eén studie voerde een gevoelige immunohistochemische test uit op beenmergaspiraten bij 20 patiënten met gelokaliseerde prostaatkanker. In de test werden drie monoklonale antilichamen (T16, C26 en AE-1) gebruikt, die in staat zijn membraan-en cytoskeletale antigenen te herkennen die door epitheliale cellen tot expressie worden gebracht om tumorcellen te detecteren. Beenmergaspiraten van 22% van de patiënten met gelokaliseerde prostaatkanker (Stadium B, 0/5; Stadium C, 2/4) en 36% van de patiënten met gemetastaseerde prostaatkanker (Stadium D1, 0/7 patiënten; Stadium D2, 4/4 patiënten) hadden antigeenpositieve cellen in hun beenmerg. Er werd geconcludeerd dat immuno-histochemische kleuring van beenmergaspiraten zeer nuttig zijn om occulte beenmergmetastasen te detecteren bij patiënten met blijkbaar gelokaliseerde prostaatkanker.
hoewel immuno-cytochemie met tumor-geassocieerde monoklonale antilichamen heeft geleid tot een verbeterd vermogen om occulte borstkankercellen in beenmergaspiraten en perifeer bloed op te sporen, is verdere ontwikkeling van deze methode noodzakelijk voordat deze routinematig kan worden gebruikt. Een belangrijk nadeel van immuno-cytochemie is dat alleen tumor-geassocieerde en niet tumor-specifieke monoklonale antilichamen worden gebruikt, en als gevolg daarvan, wat kruisreactie met normale cellen kan optreden.
voor het effectief stadium van borstkanker en het beoordelen van de werkzaamheid van purgeerschema ‘ s voorafgaand aan autologe stamcelinfusie, is het belangrijk om zelfs kleine hoeveelheden borstkankercellen te detecteren. Immuno-histochemische methoden zijn ideaal voor dit doel, omdat ze eenvoudig, gevoelig, en vrij specifiek. Franklin et al. een gevoelige immuno-cytochemische test uitgevoerd door gebruik te maken van een combinatie van vier monoklonale antilichamen (260F9, 520C9, 317G5 en BrE-3) tegen tumorceloppervlak glycoproteïnen om borsttumorcellen in beenmerg en perifeer bloed te identificeren. Zij concludeerden uit de resultaten dat het immuno-cytochemisch bevlekken van beendermerg en perifeer bloed een gevoelige en eenvoudige manier is om borstkankercellen te ontdekken en te kwantificeren.
een van de belangrijkste redenen voor metastatische recidief bij patiënten met solide tumoren is de vroege verspreiding van maligne cellen. Het gebruik van monoclonal antilichamen (mAbs) specifiek voor cytokeratins kan verspreide individuele epitheliale tumorcellen in het beendermerg identificeren.
Eén studie rapporteert dat er een immuno-cytochemische procedure is ontwikkeld voor het gelijktijdig etiketteren van cytokeratine component Nr. 18 (CK18) en prostaatspecifiek antigeen (PSA). Dit zou in de verdere karakterisering van verspreide individuele epitheliale tumorcellen in patiënten met prostate kanker helpen. De twaalf controleaspiraten van patiënten met benigne prostaathypertrofie vertoonden negatieve kleuring, wat de specificiteit van CK18 bij het detecteren van epitheliale tumorcellen in het beenmerg verder ondersteunt.
in de meeste gevallen van maligne ziekte, gecompliceerd door effusie, kunnen neoplastische cellen gemakkelijk worden herkend. Echter, in sommige gevallen, kwaadaardige cellen zijn niet zo gemakkelijk te zien of hun aanwezigheid is te twijfelachtig om het een positief rapport te noemen. Het gebruik van immuno-cytochemische technieken verhoogt de diagnostische nauwkeurigheid in deze gevallen.
Ghosh, Mason en Spriggs analyseerden 53 monsters van pleurale of peritoneale vloeistof van 41 patiënten met maligne ziekte. Conventioneel cytologisch onderzoek had geen neoplastische cellen aan het licht gebracht. Drie monoklonale antilichamen (anti-CEA, Ca 1 en HMFG-2) werden gebruikt om kwaadaardige cellen te zoeken. Immunocytochemische etikettering werd uitgevoerd op niet-bevlekte uitstrijkjes, die tot 18 maanden bij -20 °C waren bewaard. Twaalf van de eenenveertig gevallen waarin immuno-cytochemische kleuring werd uitgevoerd, onthulden kwaadaardige cellen. Het resultaat was een toename van de diagnostische nauwkeurigheid met ongeveer 20%. De studie concludeerde dat bij patiënten met vermoedelijke maligne ziekte, immuno-cytochemische etikettering routinematig moet worden gebruikt in het onderzoek van cytologisch negatieve monsters en heeft belangrijke implicaties met betrekking tot de behandeling van de patiënt.
een andere toepassing van immuno-cytochemische kleuring is voor de detectie van twee antigenen in hetzelfde uitstrijkje. Het dubbele bevlekken met lichte kettingantilichamen en met T en B celmarkers kan de neoplastische oorsprong van een lymfoom aangeven.
Eén onderzoek heeft de isolatie gemeld van een hybridoma-cellijn (kloon 1E10), die een monoklonaal antilichaam (IgM, K-isotype) produceert. Dit monoklonale antilichaam vertoont specifieke immuno-cytochemische kleuring van nucleoli.
weefsels en tumoren kunnen worden geclassificeerd op basis van hun expressie van bepaalde markers, met behulp van monoklonale antilichamen. Ze helpen bij het onderscheiden van morfologisch vergelijkbare laesies en bij het bepalen van de orgaan-of weefseloorsprong van ongedifferentieerde metastasen. Immuno-cytologische analyse van beenmerg, weefselaspiraten, lymfeklieren enz. met geselecteerde monoclonal antilichamen helpen in de opsporing van occulte metastasen. Monoclonal antilichamen verhogen de gevoeligheid in het ontdekken van zelfs kleine hoeveelheden invasieve of metastatische cellen. Monoklonale antilichamen (mAbs) specifiek voor cytokeratines kunnen gedissemineerde individuele epitheliale tumorcellen in het beenmerg detecteren.