PMC

een 14-jarige, drachtige merrie met registratiepapieren van de American Quarter Horse Association werd in maart 2000 op een veiling aangekocht, in de wetenschap dat ze gefokt was tot een verfhengst. De merrie werd geregistreerd als stevige kastanje met een ster, strip en knip, een donkere vlek boven haar neusgaten, een witte vlek in het rechter neusgat, en geen andere witte markeringen. De vader van de merrie, een geregistreerd Amerikaans verfpaard, was zuring met een overo patroon.

de dracht en de bevalling waren rustig en het veulen zoog spontaan binnen 2 uur na de geboorte. De merrie accepteerde snel het veulen, dat zeer mobiel en nieuwsgierig was in de paddock. De enige ongewone waarnemingen waren de opvallend witte vacht van het veulen en het niet passeren van het meconium (figuur 1). Binnen 12 tot 16 uur na de geboorte begon het veulen tekenen van koliek te vertonen.

bij onderzoek op dag 1 bleek het veulen erg ongemakkelijk, afwisselend staand, liggend en rollend op zijn rug. Het was helemaal wit met blauwe irides. De pupillaire lichtreflex en dreigingsreactie waren aanwezig. De orale slijmvliezen en de capillaire navultijd waren normaal, maar de hartslag was licht verhoogd (110-120 slagen/min). Er was een lichte toename van longgeluiden in de cranioventrale longvelden. Alle gewrichten, de navel en de rectale temperatuur (38°C) waren normaal. De belangrijkste bevinding was het ontbreken van borborygmi op ascultatie van de buik. Uitwerpselen waren aanwezig diep in het rectum. De klinische bevindingen suggereerden een meconiumimpactie of, waarschijnlijker, Overo lethal white syndrome (OLWS). Als ondersteunende therapie werd 120 mL minerale olie toegediend als een klysma om te helpen bij het passeren van de meconiumplug, en flunixin meglumine (Cronyxn; Vetrepharm, Belleville, Ontario), 150 mg, IV, werd gegeven om buikpijn te verlichten. De reactie op de analgesie werd duidelijk en het veulen werd liggend.

op dag 2 bleef het veulen tekenen van koliek vertonen. Euthanasie werd aanbevolen en er werden bloedmonsters genomen van de merrie en het veulen om de diagnose van OLWS te bevestigen. Het veulen werd geëuthanaseerd en er werd een postmortem uitgevoerd. Bij grof onderzoek ontbrak het veulen aan pigmentatie en was het achterlijf grofweg opgezwollen. De longen waren mild oedemateus, maar de lever, milt, nieren en bijnieren leken normaal. De buikholte bevatte serosanguinous bruine vloeistof, vermoedelijk gelekt uit de darmen voor en na de dood. Er was geen bewijs van een darmongeval en er werden geen vernauwingen geïdentificeerd langs de lengte van de darm. Het serosale oppervlak van de kleine dikke darm en het rectum was bleek. Het grootste deel van het darmkanaal was gas gevuld, en het caudale aspect van de dikke darm werd opgezwollen met deeltjes. Monsters (huid, lever, long, darm, hart, milt, nier en oog) werden verzameld in 10% gebufferde formaline en voor histopathologisch onderzoek ingediend. Histologisch, geen melanine werd gezien in de huid en er waren weinig actieve haarzakjes. Veel follikels waren verstoken van haar of waren in catagen fase (overgang tussen actieve en rust haargroei). De lever en longen waren licht verstopt. In een paar gebieden van de long, aangezogen plaveiselcel epitheliale cellen en een lichte mononucleaire cel infiltraat werden gezien. De dikke darm was normaal, behalve de afwezigheid van ganglioncellen, die compatibel was met ileocolonische aganglionose, Zoals Gezien In OLWS (2).

bloedmonsters van de merrie en het veulen werden ingediend voor DNA-analyse (Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory, College of Veterinary Medicine, University of Minnesota, St. Paul, Minnesota, USA), die bevestigde dat de merrie heterozygoot was en dat het veulen homozygoot was voor het OLW-gen.

Overo lethal white syndrome treedt op bij pasgeboren veulens die van elke ouder een kopie van het gemuteerde OLW-gen krijgen. Paarden met witte overo-patronen zijn waarschijnlijker dragers van het gen dan effen gekleurde paarden (2). Het gemuteerde gen verandert de neurale migratie of overleving van de kamcel, die de voorlopercellen voor melanocyten en intestinale ganglia beïnvloedt. Aangetaste veulens lijden aan aganglionose van de submucosale en myenterische ganglia van het distale deel van de dunne darm en van de dikke darm, wat resulteert in intestinale immotiliteit en koliek (2). Fenotypisch, veroorzaakt het veranderde gen gebrek aan huidpigmentatie en witte vachtkleur. Het overo vachtpatroon wordt beschreven als witte markeringen op de laterale en ventrale aspecten van de nek en romp, terwijl een patroon met meer wit op de rug cervicale en lumbale regio ‘ s en de benen tobiano wordt genoemd (3). De overo vacht patroon is te zien in de American paint horse, American miniatuur horse, half-Arabische, volbloed, en crop-out (niet geregistreerd vanwege overmatige witte markering) quarter horse (QH).

het letale OLWS-gen is een autosomaal dominant met variabele expressie. Heterozygoten vertonen verschillende witte vachtpatronen en kunnen in zeer zeldzame gevallen effen gekleurd zijn, bijvoorbeeld als het dominante dodelijke gen niet tot expressie wordt gebracht of spontaan is gemuteerd. Aanvullende studies zijn nodig om het sporadisch voorkomen van overo veulens van niet-Gespot QH ouders te verklaren. Twee dragers van het gemuteerde gen moeten worden gedekt om een homozygote dodelijke witte veulen te produceren. Volgens Mendelian genetics zou een overo × overo paring naar verwachting 25% effen veulens, en 50% overo veulens, en 25% OLW veulens (1) produceren.

Stamboekgegevens en observatie van geboren veulens tonen aan dat de kans op het voortbrengen van een OLWS-nageslacht minder dan 25% is. Mogelijke factoren die tot deze onverwacht lage frequentie bijdragen, zijn het niet melden van OLW-veulens voor fokregistraties, vroeg embryonaal verlies van homozygote veulens of het relatieve aandeel dragers in de fokpopulatie (1).

het begrijpen van de overerving van het letale gen is om economische redenen belangrijk, aangezien verven wenselijk zijn in westerse paardenshows, en het zou een voordeel zijn om paarden te kunnen identificeren die het overo-gen dragen (3). Onjuiste gegevens over het risico van OLWS kunnen mensen ervan weerhouden om fokdieren met Overo bloedlijnen te gebruiken. Met accurate genetische informatie kunnen fokkers de psychologische en economische verliezen in verband met het overo letale gen vermijden door het fokbestand te testen op draagkracht en bekende Overos alleen te fokken tot bewezen niet-overos.

aangezien er geen behandeling voor OLWS is, is het testen van essentieel belang om het voorkomen ervan te voorkomen (1). Voordat DNA-tests beschikbaar waren, werden dragers fenotypisch geïdentificeerd aan de hand van het aandeel wit in de vacht: hoe witter, hoe groter het risico om drager te zijn. Hoewel deze techniek de meeste dragers identificeerde, was het onnauwkeurig. Een DNA – gebaseerde test die paarden identificeert die heterozygoot zijn voor het overo dodelijke witte gen is ontwikkeld. De allel-specifieke polymerasekettingreactie test lokaliseert en versterkt de specifieke gemuteerde plaats in het endothelinreceptor-B-gen (EDNRB-gen). Deze plaats is geïdentificeerd bij mensen met de ziekte van Hirschsprung, bij wie vergelijkbare gastro-intestinale effecten van een mutatie van het ednrb-gen worden gezien. Het rangschikken van DNA van het ednrb gen toonde een dinucleotide thymine-cytosine aan adenine-guanine mutatie. Dit resulteert in substitutie van het aminozuurisoleucine voor lysine in het eerste transmembraandomein van het EDNRB-eiwit (de zogenaamde ile118lys-mutatie) (4). De ednrb-proteã ne is de oorzaak van regelgeving van embryonale neurale kamcellen die zich tot ganglia en melanocyten ontwikkelen. Veulens homozygoot voor de Ile118Lys-mutatie in het EDNRB-gen hebben slechts 20% van het functionele eiwitvermogen van controlepaarden (5). Innervatie aan de darm is verminderd, waardoor fatale constipatie. Heterozygoten hebben meestal het overo vachtpatroon zonder darmafwijkingen. In een studie ter bepaling van het fenotype van heterozygoten was > 95% Overo en < 1% effen gekleurd (2). Variatie in de expressie van het overo-patroon en het onvermogen om het exacte genotype van het fenotype te voorspellen zijn te wijten aan toename van de witte kleuring door andere genen. Om het sporadisch voorkomen van een OLW veulen uit een effen kleur QH te verklaren, is verder onderzoek nodig om dit multifactoriële overervingspatroon te begrijpen. De associatie tussen vachtkleurvlekken, intestinale aganglionose en mutaties van het ednrb-gen is bestudeerd in muismodellen (6,7). Het is mogelijk dat het EDNRB-gen in de QH spontaan muteert of in een hoger tempo muteert dan bij knaagdieren (2).Een goede bemonstering is belangrijk voor DNA-analyse. Bloed of haar monsters kunnen worden gebruikt, maar er zijn problemen bij het verkrijgen van DNA uit bloed, en het bloed moet worden unblotted, gekoeld bewaard en geleverd aan het laboratorium binnen 24 uur. haar monsters moeten de wortels en 15 tot 20 haren omvatten, en kan worden verzameld uit de manen of staart, en vereisen geen specifieke verpakking (Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory, University Of Minnesota, persoonlijke communicatie).

dit geval toont de klassieke klinische en pathologische presentatie aan van een OLW veulen met een ongebruikelijke ouderlijke afstamming. De QH merrie vertegenwoordigt het kleine aandeel van effen gekleurde heterozygoten.