barwienie tunelowe i test tunelowy

Gao Y et al. używany zestaw testowy HRP-DAB TUNEL ab206386 do analizy sekcji tkanek z jajników myszy. A. sekcja traktowana DNase I jako kontrola pozytywna. B. Kontrola negatywna bez enzymu TDT. C i F. reprezentatywne obrazy eksperymentalne. Jądra barwione metodą tunelową są brązowe. Sekcje były kontrastowane zielenią metylową.

zalety i wady metod barwienia tunelowego

protokoły barwienia tunelowego / tunelowego, które wykorzystują nukleotyd bezpośrednio oznaczony barwnikiem fluorescencyjnym, są szybsze niż metody pośrednie, które wykorzystują przeciwciało lub kompleks streptawidyny-biotyny, ponieważ wymagają mniej etapów barwienia.

metody, które opierają się na nukleotydach oznaczonych biotyną, mogą korzystać z amplifikacji kompleksu streptawidyna-biotyna. Wymagają dodatkowych kroków blokujących, aby zneutralizować endogenną biotynę i zmniejszyć barwienie tła, chociaż są one wspólne dla wszystkich badaczy prowadzących tradycyjną immunohistochemię chromogenną.

metody oparte na BrdU mogą również wytwarzać jaśniejszy sygnał, ponieważ BrdU jest zwykle łatwiejsze do włączenia przez enzym TdT.

względna popularność TUNEL barwienia / metody test TUNEL

badanie 50 prace badawcze opublikowane w 2017 zawierające termin „Test TUNEL” lub „barwienie TUNEL”, wykazały, że:

– 50% Papierów zastosowanych dUTP bezpośrednio skoniugowanych do FITC

– 15% zastosowanych biotyna-dUTP i streptawidyna-HRP

– 15% zastosowanych FITC-dUTP i przeciwciało anty-FITC skoniugowane do HRP

– 12% zastosowanych digoksygenina-dUTP i przeciwciało anty-digoksygenina skoniugowane do barwnika fluorescencyjnego lub HRP

– 8% zastosowało br-dutp i przeciwciało anty-Brdu sprzężone z barwnikiem fluorescencyjnym

wszystkie badane prace wykorzystały test tunela w obrazowaniu zamiast cytometrii przepływowej. Tam, gdzie stosowano HRP, dodano podłoże DAB, aby utworzyć brązową plamę. Ponad 90% prac badawczych używało zestawu do barwienia tuneli.