PMC

14-letnia, ciężarna klacz z dokumentami rejestracyjnymi American Quarter Horse Association została zakupiona na aukcji w marcu 2000 roku, ze świadomością, że została wyhodowana na ogiera paint. Klacz była zarejestrowana jako solidna kasztanowata z gwiazdą, pasem i cięciem, ciemną plamą nad nozdrzami, białą plamą w prawym nozdrzu i żadnymi innymi białymi znakami. Reproduktorem klaczy, zarejestrowanym amerykańskim koniem farbowym, był szczaw o wzorze Overo.

ciąża i poród nie przebiegały prawidłowo, a źrebak ssał się samoistnie w ciągu 2 godzin od porodu. Klacz szybko przyjęła źrebię, które na padoku było bardzo ruchliwe i dociekliwe. Jedynymi niezwykłymi obserwacjami była wyraźnie Biała sierść źrebaka i brak przejścia przez smółkę (ryc. 1). W ciągu 12 do 16 godzin od urodzenia źrebak zaczął wykazywać objawy kolki.

podczas badania pierwszego dnia źrebię wydawało się bardzo niewygodne, naprzemiennie stojąc, leżąc i tocząc się na plecach. Był całkowicie biały z niebieskimi irydami. Odruch świetlny źrenic i reakcja zagrożenia były obecne. Błony śluzowe jamy ustnej i czas napełniania naczyń włosowatych były normalne, ale częstość akcji serca była nieznacznie podwyższona (110-120 uderzeń/min). Odnotowano łagodny wzrost dźwięków płuc w polach płucno-czaszkowych. Wszystkie stawy, pępek i temperatura odbytnicy (38°C) były w normie. Najbardziej znaczącym odkryciem był brak borborygmi na wznoszeniu brzucha. Kał był obecny głęboko w odbytnicy. Wyniki badań klinicznych sugerowały wpływ smółki lub, bardziej prawdopodobne, zespół Overo lethal white (OLWS). Jako leczenie wspomagające podano 120 mL oleju mineralnego jako lewatywę, aby pomóc w przejściu wtyczki smołowej, a megluminę fluniksyny (Cronyxn; Vetrepharm, Belleville, Ontario), 150 mg, IV, aby złagodzić ból brzucha. Odpowiedź na analgezję była zaznaczona i źrebak leżał.

w drugim dniu źrebię nadal wykazywało objawy kolki. Zalecono eutanazję i pobrano próbki krwi od klaczy i źrebaka, aby potwierdzić diagnozę OLWS. Źrebię poddano eutanazji i wykonano sekcję zwłok. Podczas grubego badania źrebię nie miało pigmentacji, a brzuch był rażąco rozdęty. Płuca były lekko obrzękowe, ale wątroba, śledziona, nerki i nadnercza wydawały się normalne. Jama otrzewnowa zawierała serosanguinous brown fluid, podejrzewany o wyciek z jelit przed i po śmierci. Nie stwierdzono żadnych oznak wypadku jelitowego i nie stwierdzono żadnych zwężeń wzdłuż jelita. Powierzchnia serosalna małego okrężnicy i odbytnicy była blada. Większość przewodu pokarmowego była wypełniona gazem, a część ogonowa jelita grubego była rozdęta cząstkami stałymi. Próbki (skóra, wątroba, płuca, jelito, serce, śledziona, nerki i oko) pobrano do 10% buforowanej formaliny i poddano badaniu histopatologicznemu. Histologicznie nie stwierdzono obecności melaniny w skórze i nie było aktywnych mieszków włosowych. Wiele mieszków włosowych było pozbawionych włosów lub znajdowało się w fazie katagenu (przejście między aktywnym a spoczynkowym wzrostem włosów). Wątroba i płuca były lekko zatłoczone. W kilku obszarach płuc, aspiracji komórek nabłonka płaskonabłonkowego i lekkie komórki jednojądrzaste naciek. Okrężnica była prawidłowa, z wyjątkiem braku komórek zwojowych, co było zgodne z aganglionozą jelitowo-kolonową, jak stwierdzono u OLWS (2).

próbki krwi klaczy i źrebaka zostały przedłożone do analizy DNA (Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory, College of Veterinary Medicine, University of Minnesota, St. Paul, Minnesota, USA), który potwierdził, że klacz jest heterozygotyczna, a źrebak homozygotyczny dla genu OLW.

zespół Overo lethal white występuje u nowo narodzonych źrebiąt, które otrzymują kopię zmutowanego genu OLW od każdego rodzica. Konie o białym wzorze Overo są bardziej prawdopodobnymi nosicielami genu niż konie o jednolitym kolorze (2). Zmutowany gen zmienia migrację lub przeżycie komórek grzebienia nerwowego, co wpływa na komórki progenitorowe dla melanocytów i zwojów jelitowych. Dotknięte źrebięta cierpią na aganglionozę zwojów podśluzówkowych i śródmiąższowych dystalnej części jelita cienkiego i jelita grubego, co prowadzi do niemocy jelit i kolki (2). Fenotypowo zmieniony gen powoduje brak pigmentacji skóry i białego koloru sierści. Wzór płaszcza Overo jest opisany jako białe znaki na bocznych i brzusznych aspektach szyi i tułowia, Natomiast wzór z bardziej białymi na grzbietowych obszarach szyjnych i lędźwiowych oraz nogach nazywa się tobiano (3). Wzór płaszcza Overo jest widoczny w koniu American paint, amerykańskim koniu miniaturowym, pół-arabskim, rasistowskim i crop-out (niezarejestrowanym z powodu nadmiernego białego oznakowania) quarter horse (QH).

zabójczy Gen OLWS jest autosomalną dominantą o zmiennej ekspresji. Heterozygoty wykazują różne białe wzory sierści, a w bardzo rzadkich przypadkach mogą być jednobarwne; na przykład, jeśli dominujący gen śmiertelny nie jest wyrażony lub spontanicznie zmutował. Dodatkowe badania są konieczne, aby wyjaśnić sporadyczne występowanie Overo źrebiąt od niepoprawionych rodziców QH. Dwa nośniki zmutowanego genu muszą być połączone, aby wytworzyć homozygotyczne śmiertelne białe źrebię. Zgodnie z genetyką Mendla, w przypadku krycia Overo × Overo spodziewane jest uzyskanie 25% źrebiąt o jednolitym kolorze, 50% źrebiąt Overo i 25% źrebiąt OLW (1).

zapisy z Księgi Stadnej i obserwacje urodzonych źrebiąt pokazują, że prawdopodobieństwo wydania potomstwa OLWS jest mniejsze niż 25%. Możliwe czynniki przyczyniające się do tej nieoczekiwanie niskiej częstotliwości mogą obejmować brak zgłoszenia źrebiąt OLW do rejestracji hodowlanej, wczesną utratę zarodków źrebiąt homozygotowych lub względny odsetek nosicieli w populacji hodowlanej (1).

zrozumienie dziedziczenia śmiertelnego genu jest ważne ze względów ekonomicznych, ponieważ farby są pożądane na zachodnich pokazach koni, a zaletą byłaby możliwość identyfikacji koni posiadających Gen Overo (3). Niedokładne dane dotyczące ryzyka występowania OLWS mogą zniechęcić ludzi do używania stada hodowlanego z liniami Krwiowymi Overo. Dzięki dokładnej informacji genetycznej hodowcy mogli uniknąć strat psychologicznych i ekonomicznych związanych z zabójczym genem Overo, testując stado hodowlane pod kątem statusu nosiciela i hodowli znanej Overos tylko dla sprawdzonych non-Overos.

ponieważ nie ma leczenia OLWS, badanie jest niezbędne, aby zapobiec jego wystąpieniu (1). Zanim badania DNA były dostępne, nośniki identyfikowano fenotypowo na podstawie proporcji bieli w płaszczu: im więcej bieli, tym większe ryzyko bycia nosicielem. Chociaż technika ta zidentyfikowała większość nosicieli, była niedokładna. Opracowano test oparty na DNA, który identyfikuje konie heterozygotyczne dla nadnaturalnego białego genu. Test reakcji łańcuchowej polimerazy specyficznej dla alleli lokalizuje i wzmacnia specyficzne zmutowane miejsce w genie B receptora endoteliny (Gen EDNRB). Miejsce to zostało zidentyfikowane u ludzi z chorobą Hirschsprunga, u których obserwuje się podobne efekty żołądkowo-jelitowe wynikające z mutacji genu EDNRB. Sekwencjonowanie DNA genu EDNRB ujawniło mutację dinukleotydu tymina-cytozyna do adeniny-guaniny. Prowadzi to do zastąpienia aminokwasu izoleucyny lizyną w pierwszej domenie transbłonowej białka EDNRB (określanej mutacją Ile118Lys) (4). Białko EDNRB jest odpowiedzialne za regulację embrionalnych komórek grzebienia nerwowego, które rozwijają się w zwoje i melanocyty. Źrebięta homozygotyczne dla mutacji Ile118Lys w genie EDNRB mają tylko 20% funkcjonalnej zdolności białkowej koni kontrolnych (5). Unerwienie jelita jest upośledzone, powodując śmiertelne zaparcia. Heterozygoty zwykle mają wzór Nadoczodołowy bez nieprawidłowości jelitowych. W badaniu mającym na celu określenie fenotypu heterozygotów, > 95% miało barwę Overo, a < 1% miało barwę stałą (2). Różnice w ekspresji wzoru Overo i niemożność przewidzenia dokładnego genotypu z fenotypu są spowodowane zwiększeniem białego zabarwienia przez inne geny. Aby wyjaśnić sporadyczne występowanie źrebięcia OLW z litego koloru QH, konieczne są dalsze badania, aby zrozumieć ten wieloczynnikowy wzór dziedziczenia. Związek między plamieniem koloru sierści, aganglionozą jelitową i mutacjami genu EDNRB badano w modelach mysich (6,7). Możliwe jest, że Gen EDNRB w QH spontanicznie mutuje lub mutuje z większą szybkością niż u gryzoni (2).

prawidłowe pobieranie próbek jest ważne dla analizy DNA. Próbki krwi lub włosów mogą być używane, ale istnieją trudności w uzyskaniu DNA z krwi, a krew musi być rozpakowana, przechowywana w lodówce i dostarczana do laboratorium w ciągu 24 godzin. próbki włosów muszą zawierać korzenie i 15 do 20 włosów, i mogą być pobierane z grzywy lub ogona i nie wymagają specjalnego opakowania (Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory, University of Minnesota, personal communication).

ten przypadek pokazuje klasyczną kliniczną i patologiczną prezentację źrebaka OLW o nietypowej linii rodzicielskiej. Klacz QH reprezentuje niewielki odsetek heterozygotów o jednolitym kolorze.