VSV-ΔG-GFP de Plasmídeo de Expressão Vector

O plasmídeo pVSV-ΔG-GFP codifica o antigenomic-senso (ou positiva-sentimento) RNA de um replicaton restrito recombinante vírus da estomatite vesicular (rVSV) em que a glicoproteína (G) do gene foi substituído com GFP. Este plasmídeo é usado juntamente com plasmídeos que codificam o nucleocapsídeo VSV (N), fosfoproteína (P), glicoproteína (G), e grande subunidade polimerase (L) para a recuperação do vírus ΔG-G pseudotipado VSV-GFP, como descrito em . O antigenomic RNA de ΔG-GFP é expresso a partir do bacteriófago T7 promoter em pBS, que foi posteriormente modificada para conter o vírus da hepatite delta ribozyme usado para gerar um precisos 3′ fim do VSV antigenomic RNA e um terminador T7 seqüência clonada entre o SacII e SacI sítios de restrição em pBS-SK+ .Foi utilizado

estomatite vesiculosa recombinante viru-ΔG (rVSV-ΔG) para produzir pseudotipos VSV contendo as glicoproteínas de envelope de vírus heterólogos, incluindo vírus que requerem contenção de alto nível. Uma vez que a infecciosidade do rVSV-ΔG se restringe a uma única série de replicações, as análises da entrada viral podem ser realizadas utilizando apenas o confinamento do nível de biossegurança 2 (BSL-2).

é da responsabilidade do investigador principal procurar a aprovação do Comité de segurança da biossegurança institucional para a utilização de ADN recombinante, animal transgénico ou agente infeccioso nos seus espaços laboratoriais e manter uma aprovação do Comité de segurança da biossegurança institucional durante o período em que estes materiais são utilizados.

From the laboratory of Michael A. Whitt, Ph. D., University of Tennessee.

parte do programa anexo do investigador.