Tehnologia Hybridoma
utilizarea anticorpilor monoclonali este numeroasă și include prevenirea, diagnosticarea și tratamentul bolii. De exemplu, anticorpii monoclonali pot distinge subseturi de celule B și celule T, ceea ce este util în identificarea diferitelor tipuri de leucemii. În plus, anticorpii monoclonali specifici au fost utilizați pentru a defini markerii suprafeței celulare pe celulele albe din sânge și alte tipuri de celule. Acest lucru a dus la clusterul de diferențiere serie de markeri. Acestea sunt adesea denumite markeri CD și definesc câteva sute de componente diferite ale suprafeței celulare ale celulelor, fiecare specificată prin legarea unui anumit anticorp monoclonal. Astfel de anticorpi sunt extrem de utili pentru sortarea celulelor activate prin fluorescență, izolarea specifică a anumitor tipuri de celule.
în histopatologia diagnosticuluiedit
cu ajutorul anticorpilor monoclonali, țesuturile și organele pot fi clasificate pe baza expresiei anumitor markeri definiți, care reflectă Geneza tisulară sau celulară. Antigenul specific prostatic, fosfataza alcalină placentară, gonadotrofina corionică umană, fetoproteina și altele sunt antigene asociate organelor, iar producerea de anticorpi monoclonali împotriva acestor antigene ajută la determinarea naturii unei tumori primare.
anticorpii monoclonali sunt utili în special în distingerea leziunilor morfologic similare, cum ar fi mezoteliomul pleural și peritoneal, adenocarcinomul și în determinarea originii organelor sau țesuturilor metastazelor nediferențiate. Anticorpii monoclonali selectați ajută la detectarea metastazelor oculte (cancer de origine primară necunoscută) prin analiza imuno-citologică a măduvei osoase, a altor aspirate tisulare, precum și a ganglionilor limfatici și a altor țesuturi și pot avea o sensibilitate crescută față de colorarea histopatologică normală.
un studiu a efectuat un test imuno-histochimic sensibil pe aspirații de măduvă osoasă la 20 de pacienți cu cancer de prostată localizat. În cadrul testului au fost utilizați trei anticorpi monoclonali (T16, C26 și AE-1), capabili să recunoască antigenele membranare și citoscheletale exprimate de celulele epiteliale pentru detectarea celulelor tumorale. Aspirații de măduvă osoasă de 22% dintre pacienții cu cancer de prostată localizat (stadiul B, 0/5; stadiul C, 2/4) și 36% pacienți cu cancer de prostată metastatic (stadiul D1, 0/7 pacienți; stadiul D2, 4/4 pacienți) au avut celule antigen-pozitive în măduva osoasă. S-a concluzionat că colorarea imuno-histochimică a aspiraților măduvei osoase este foarte utilă pentru detectarea metastazelor măduvei osoase oculte la pacienții cu cancer de prostată aparent localizat.
deși imuno-citochimia care utilizează anticorpi monoclonali asociați tumorii a condus la o capacitate îmbunătățită de a detecta celulele cancerului de sân ocult în aspirații măduvei osoase și în sângele periferic, este necesară dezvoltarea ulterioară a acestei metode înainte de a putea fi utilizată în mod obișnuit. Un dezavantaj major al imuno-citochimiei este că se utilizează numai anticorpi monoclonali asociați tumorii și nu specifici tumorii și, ca urmare, poate apărea o reacție încrucișată cu celulele normale.
pentru a stadializa eficient cancerul de sân și pentru a evalua eficacitatea regimurilor de purjare înainte de perfuzia cu celule stem autologe, este important să se detecteze chiar și cantități mici de celule canceroase de sân. Metodele imuno-histochimice sunt ideale în acest scop, deoarece sunt simple, sensibile și destul de specifice. Franklin și colab. s-a efectuat un test imuno-citochimic sensibil utilizând o combinație de patru anticorpi monoclonali (260f9, 520c9, 317g5 și BrE-3) împotriva glicoproteinelor de suprafață ale celulelor tumorale pentru a identifica celulele tumorale mamare din măduva osoasă și sângele periferic. Ei au concluzionat din rezultate că colorarea imuno-citochimică a măduvei osoase și a sângelui periferic este o modalitate sensibilă și simplă de a detecta și cuantifica celulele cancerului de sân.
unul dintre principalele motive pentru recidiva metastatică la pacienții cu tumori solide este diseminarea timpurie a celulelor maligne. Utilizarea anticorpilor monoclonali (mab) specifici pentru citokeratine poate identifica celulele tumorale epiteliale individuale diseminate în măduva osoasă.
un studiu raportează că a dezvoltat o procedură imuno-citochimică pentru etichetarea simultană a componentei citokeratinei nr. 18 (CK18) și a antigenului specific prostatic (PSA). Acest lucru ar ajuta la caracterizarea ulterioară a celulelor tumorale epiteliale individuale diseminate la pacienții cu cancer de prostată. Cei doisprezece aspirați de control de la pacienții cu hipertrofie benignă de prostată au prezentat colorație negativă, care susține în continuare specificitatea CK18 în detectarea celulelor tumorale epiteliale din măduva osoasă.
în majoritatea cazurilor de boală malignă complicată de efuziune, celulele neoplazice pot fi ușor recunoscute. Cu toate acestea, în unele cazuri, celulele maligne nu sunt atât de ușor de văzut sau prezența lor este prea îndoielnică pentru a o numi un raport pozitiv. Utilizarea tehnicilor imuno-citochimice crește precizia diagnosticului în aceste cazuri.
Ghosh, Mason și Spriggs au analizat 53 de probe de lichid pleural sau peritoneal de la 41 de pacienți cu boală malignă. Examenul citologic convențional nu a evidențiat celule neoplazice. Trei anticorpi monoclonali (anti-cea, CA 1 și HMFG-2) au fost utilizați pentru a căuta celule maligne. Etichetarea imunocitochimică s-a efectuat pe frotiuri nepătate, care au fost păstrate la -20 CTC până la 18 luni. Douăsprezece din cele patruzeci și unu de cazuri în care a fost efectuată colorarea imuno-citochimică, au evidențiat celule maligne. Rezultatul a reprezentat o creștere a preciziei diagnosticului de aproximativ 20%. Studiul a concluzionat că la pacienții cu boală malignă suspectată, etichetarea imuno-citochimică trebuie utilizată în mod obișnuit în examinarea probelor citologic negative și are implicații importante în ceea ce privește managementul pacientului.
o altă aplicație a colorării imuno-citochimice este pentru detectarea a doi antigeni în același frotiu. Colorarea dublă cu anticorpi cu lanț ușor și cu markeri de celule T și B poate indica originea neoplazică a unui limfom.
un studiu a raportat izolarea unei linii celulare hibridoma (clona 1E10), care produce un anticorp monoclonal (IgM, izotip k). Acest anticorp monoclonal prezintă o colorare imuno-citochimică specifică a nucleolilor.
țesuturile și tumorile pot fi clasificate în funcție de exprimarea anumitor markeri, cu ajutorul anticorpilor monoclonali. Ele ajută la distingerea leziunilor similare morfologic și la determinarea originii organelor sau țesuturilor metastazelor nediferențiate. Analiza imuno-citologică a măduvei osoase, a aspirațiilor tisulare, a ganglionilor limfatici etc. cu anticorpi monoclonali selectați ajută la detectarea metastazelor oculte. Anticorpii monoclonali cresc sensibilitatea în detectarea chiar și a unor cantități mici de celule invazive sau metastatice. Anticorpii monoclonali (mab) specifici pentru citokeratine pot detecta celulele tumorale epiteliale individuale diseminate în măduva osoasă.