TUNELFÄRGNING och TUNELANALYSEN

Gao Y et al. används HRP-DAB TUNEL analyssats ab206386 för att analysera vävnadssektioner från musäggstockar. A. avsnitt behandlas med DNase I som positiv kontroll. B. negativ kontroll utan TDT-enzym. C och f. representativa experimentella bilder. Kärnor färgade med TUNELANALYSEN är bruna. Sektionerna motfärgades med Metylgrön.

fördelar och nackdelar med tunelfärgningsmetoder

TUNELFÄRGNING / TUNELANALYSPROTOKOLL som använder en nukleotid direkt taggad med ett fluorescerande färgämne är snabbare än indirekta metoder, som använder antingen en antikropp eller ett streptavidin-biotin-komplex, eftersom de kräver mindre färgningssteg.

metoder som är beroende av biotin-märkta nukleotider kan dra nytta av förstärkningen av streptavidin-biotin-komplexet. De kräver ytterligare blockeringssteg för att neutralisera endogent biotin och minska bakgrundsfärgning, även om dessa är vanliga för alla forskare som kör traditionell kromogen immunhistokemi.

BrdU – baserade metoder kan också producera en ljusare signal eftersom BrdU vanligtvis lättare införlivas av TDT-enzymet.

den relativa populariteten för TUNEL staining / TUNEL assay methods

en undersökning av 50 forskningshandlingar publicerade 2017 innehållande termen ”TUNEL Assay” eller ”TUNEL Staining” avslöjade att:

– 50% av papper som används dUTP direkt konjugerad till FITC

– 15% använt biotin-dUTP och streptavidin-HRP

– 15% använt FITC-dutp och en anti-FITC – antikropp konjugerad till HRP

-12% använt digoxygenin-dUTP, och en anti – digoxygenin-antikropp konjugerad till antingen ett fluorescerande färgämne eller HRP

-8% använde br-dutp och en anti-brdu-antikropp konjugerad till ett fluorescerande färgämne

alla undersökta papper använde Tunel-analysen i bildbehandling snarare än flödescytometri. Där HRP användes tillsattes DAB-substrat för att skapa en brun fläck. Mer än 90% av forskningsdokumenten använde ett kit för TUNELFÄRGNING.