VSV-KRISHG-GFP Plasmidekspressionsvektor

plasmidet pVSV-KRISHG-GFP koder for antigenomisk-sense (eller positiv-sense) RNA af en replicaton-begrænset rekombinant vesikulær stomatitis virus (rVSV), hvor glycoprotein (G) genet er blevet erstattet med GFP. Dette plasmid anvendes sammen med plasmider, der koder for VSV nucleocapsid (N), phosphoprotein (P), glycoprotein (G) og stor polymeraseunderenhed (L) til genvinding VSV-G pseudotypet LENGG-GFP-virus som beskrevet i . Det antigenomiske RNA af PRISHG-GFP udtrykkes fra bakteriofagen T7-promotor i pBS, som er blevet yderligere modificeret til at indeholde hepatitis delta-ribosymet, der anvendes til at generere en præcis 3′ – ende af VSV antigenomisk RNA og en T7-terminatorsekvens klonet mellem SacII-og SacI-restriktionsstederne i pBS-SK+ .

rekombinant vesikulær stomatitis viru-Karg (RVSV-Karg) er blevet anvendt til at fremstille VSV-pseudotyper, der indeholder hylsterglycoproteiner fra heterologe vira, herunder vira, der kræver indeslutning på højt niveau. Da infektiviteten af rVSV-larg er begrænset til en enkelt replikationsrunde, kan analyser af viral indgang udføres ved hjælp af bare biosikkerhedsniveau 2 (BSL-2) indeslutning.

det er hovedundersøgerens ansvar at søge godkendelse fra Udvalget for institutionel biosikkerhed til rekombinant DNA, transgen dyr eller infektiøst middel inden for deres laboratorierum og opretholde en godkendelse fra Udvalget for institutionel biosikkerhed i den periode, disse materialer anvendes.

fra laboratoriet for Michael A. hvid, Ph. D., University of Tennessee.

del af investigatorens bilag program.