Vector de Expresión de plásmido VSV-ΔG-GFP

El plásmido pVSV-ΔG-GFP codifica el ARN de sentido antigenómico (o sentido positivo) de un virus de la estomatitis vesicular recombinante restringido a replicación (vSVS) en el que el gen de la glicoproteína (G) ha sido reemplazado por GFP. Este plásmido se usa junto con plásmidos que codifican la nucleocápsida VSV (N), la fosfoproteína (P), la glicoproteína (G) y la subunidad de la polimerasa grande (L) para recuperar el virus ΔG-GFP pseudotipado VSV-G, como se describe en . El ARN antigenómico de ΔG-GFP se expresa a partir del promotor bacteriófago T7 en pBS, que ha sido modificado para contener la ribozima de hepatitis delta utilizada para generar un extremo 3′ preciso del ARN antigenómico VSV y una secuencia de terminadores T7 clonada entre los sitios de restricción de SacII y SacI en pBS-SK+ .

Se ha utilizado la estomatitis vesicular recombinante viru-ΔG (rVSV-ΔG) para producir seudotipos de VSV que contienen las glicoproteínas de la envoltura de virus heterólogos, incluidos virus que requieren un alto nivel de contención. Dado que la infectividad del rVSV-ΔG está restringida a una sola ronda de replicación, los análisis de entrada viral se pueden realizar usando solo contención de nivel de bioseguridad 2 (BSL-2).

Es responsabilidad del investigador principal solicitar la aprobación del Comité de Bioseguridad y Seguridad Institucional para el uso de ADN recombinante, animales transgénicos o agentes infecciosos dentro de sus espacios de laboratorio y mantener una aprobación del Comité de Bioseguridad y Seguridad Institucional durante el período de tiempo en que se utilizan estos materiales.

Del laboratorio de Michael A. Whitt, Ph. D., Universidad de Tennessee.

Parte del programa Anexo del Investigador.