Vecteur d’Expression du plasmide VSV-ΔG-GFP

Le plasmide pVSV-ΔG-GFP code pour l’ARN à sens antigénomique (ou à sens positif) d’un virus de la stomatite vésiculaire recombinante à réplicaton restreint (rVSV) dans lequel le gène de la glycoprotéine (G) a été remplacé par du GFP. Ce plasmide est utilisé avec des plasmides codant pour la nucléocapside VSV (N), la phosphoprotéine (P), la glycoprotéine (G) et la grande sous-unité de polymérase (L) pour la récupération du virus ΔG-GFP pseudotypé VSV-G comme décrit dans. L’ARN antigénomique de ΔG-GFP est exprimé à partir du promoteur bactériophage T7 dans le pBS, qui a été modifié pour contenir le ribozyme delta de l’hépatite utilisé pour générer une extrémité 3′ précise de l’ARN antigénomique du VSV et une séquence terminatrice T7 clonée entre les sites de restriction SacII et SacI dans le pBS-SK+.

La stomatite vésiculaire recombinante viru-ΔG (rVSV-ΔG) a été utilisée pour produire des pseudotypes VSV contenant les glycoprotéines d’enveloppe de virus hétérologues, y compris les virus nécessitant un confinement de haut niveau. Étant donné que l’infectiosité du rVSV-ΔG est limitée à un seul cycle de réplication, des analyses de l’entrée virale peuvent être effectuées en utilisant uniquement un confinement de niveau de biosécurité 2 (BSL-2).

Il incombe au chercheur principal de demander l’approbation du Comité de sécurité en matière de biosécurité en Établissement pour l’utilisation d’ADN recombinant, d’animaux transgéniques ou d’agents infectieux dans ses espaces de laboratoire et de maintenir une approbation du Comité de sécurité en matière de biosécurité en Établissement pendant la période pendant laquelle ces matériaux sont utilisés.

Du laboratoire de Michael A. Whitt, Ph.D., Université du Tennessee.

Partie du programme Annexe de l’enquêteur.