VSV-ΔG-GFP-Plasmid-Expressionsvektor

Das Plasmid pVSV-ΔG-GFP kodiert die Antigenom-Sense- (oder Positiv-Sense-) RNA eines replicaton-restriktiven rekombinanten vesikulären Stomatitis-Virus (rVSV), in dem das Glykoprotein (G) -Gen durch GFP ersetzt wurde. Dieses Plasmid wird zusammen mit Plasmiden verwendet, die für das VSV-Nukleokapsid (N), Phosphoprotein (P), Glykoprotein (G) und die große Polymerase-Untereinheit (L) kodieren, um das VSV-G-pseudotypisierte ΔG-GFP-Virus wie in . Die antigenomische RNA von ΔG-GFP wird aus dem Bakteriophagen-T7-Promotor in pBS exprimiert, der weiter modifiziert wurde, um das Hepatitis-Delta-Ribozym zu enthalten, das verwendet wird, um ein genaues 3′-Ende der VSV-antigenomischen RNA und eine T7-Terminatorsequenz zu erzeugen kloniert zwischen den SacII- und SacI-Restriktionsstellen in pBS-SK + .

Rekombinantes vesikuläres Stomatitis-Virus-ΔG (rVSV-ΔG) wurde zur Herstellung von VSV-Pseudotypen verwendet, die die Hüllglykoproteine heterologer Viren enthalten, einschließlich Viren, die eine hochgradige Eindämmung erfordern. Da die Infektiosität von rVSV-ΔG auf eine einzige Replikationsrunde beschränkt ist, können Analysen des Viruseintritts nur mit BSL-2 (Biosafety Level 2) durchgeführt werden.

Es liegt in der Verantwortung des Principal Investigators, die Genehmigung des Institutional Biosafety Safety Committee für die Verwendung von rekombinanter DNA, transgenen Tieren oder infektiösen Agenzien in seinen Laborräumen einzuholen und während des Zeitraums, in dem diese Materialien verwendet werden, die Genehmigung des Institutional Biosafety Safety Committee aufrechtzuerhalten.

Aus dem Labor von Michael A. Whitt, Ph.D., University of Tennessee.

Teil des Investigator’s Annexe-Programms.