LNCaP
Wu et al. (1994) reprodujeron los tumores de LNCaP de origen humano en ratones inmunocomprometidos mediante la inyección conjunta de células LNCaP con fibroblastos óseos humanos con esclerosis múltiple. Se inyectaron células subcutáneamente en múltiples sitios en el costado del ratón y, después de aproximadamente 4 semanas de crecimiento, los tumores se detectaron fácilmente mediante examen físico y tuvieron una tasa de crecimiento alta (17-33 mm3/día).
Para replicar el cambio característico de las células de la PCa a la IA, se castró a los ratones huésped de la LNCaP mediante una incisión en la parte media del ojo aproximadamente 8 semanas después de la inyección. Los tumores se mantuvieron en huéspedes castrados durante 4 a 5 semanas, momento en el que se recolectaron los tumores restantes. En total, se recolectaron dos subconjuntos de células de huéspedes castrados: C4 y C5, recolectados a las 4 y 5 semanas, respectivamente.
Para seleccionar más células AI-PCa, la sublina C4 se inyectó conjuntamente con fibroblastos humanos con EM en un huésped castrado. Los tumores resultantes se aislaron y se generó una sublina adicional, C4-2.
Las comparaciones de cariotipos indican que las células de la cápsula cultivada en huéspedes intactos (sublina M) tienen un número de distribución cromosómica modal de 83, sublinas C4 y C5 con 85, y la sublina C4-2 con 83.
Para verificar aún más que estas células eran de origen humano, el análisis de cariotipos determinó que las células LNCaP parentales tenían 7 cromosomas marcadores distintos, con dos copias de cada uno. Las sublinas M, C4, C5 y C4-2 contenían la mayoría de los cromosomas marcadores, siendo la sublina M más similar a las células LNCaP parentales. C4, C5 y C4-2 son solo minuciosamente distintos de LNCaP y la sublina M con la adición de un cromosoma marcador resultante de una adición de segmento al cromosoma 6. Un cromosoma Y no está presente en la mayoría de las células C4, C5 y C4-2, lo que sugiere alteraciones cromosómicas mayores.
Las sublinas C4, C5 y C4-2 crecen bien en condiciones de cultivo de tejidos idénticas a las de LNCaP con tasas de crecimiento similares. Las sublinas LNCaP, M, C4 y C5 parentales tienen niveles de expresión génica basales similares de ornitina descarboxilasa (ODC) y Antígeno Prostático Específico (PSA); sin embargo, las sublinas M, C4 y C5 expresan 5 a 10 veces más ARNm de PSA. M, C4, C5 y C4-2 también expresaron una reducción del ARNm del receptor de andrógenos humanos como se esperaba en las células IA.
Insensibilidad a andrógenos Todas las sublinas se trataron con dihidrotestosterona (DHT), un ligando de alta afinidad para la RA. El tratamiento con DHT provocó un crecimiento marcadamente reducido en las células C4 y C5 y ningún crecimiento en las células C4-2 en comparación con la alta tasa de crecimiento observada en las células LNCaP, lo que sugiere una sensibilidad androgénica reducida en las células C4 y C5 y la IA en las células C4-2. El ensayo de AR de células enteras también indicó que las células LNCaP tienen una forma de AR de afinidad mucho mayor (Kd = 159 pM) en comparación con C4-2 (Kd = 267 pM).
Las sublinas TumorigenicityC4 y C5 muestran un aumento considerable de la tumorigenicidad cuando se inyectan en ratones machos intactos, a diferencia de las células LNCaP parentales. C4 y C5 también fueron capaces de formar carcinomas altamente vascularizados en ratones castrados cuando se inyectaron conjuntamente con fibroblastos humanos con EM. El C4-2 sublínea más fácilmente las formas de tumores en intactos los ejércitos de C4 y C5 sublíneas y son las únicas células capaces de formar tumores en castrado host sin la co-inyección de MS de huesos humanos de los fibroblastos. Estos mismos tumores C4-2 se tiñeron para detectar el PSA y secretaron concentraciones altas de PSA en el medio de crecimiento.