LNCaP

Wu et al. (1994) reproduserte De humane avledede lncap-svulstene i immunkompromitterte mus ved samtidig injeksjon Av LNCaP-celler med MS-humane benfibroblaster. Celler ble injisert subkutant på flere steder i museflanken, og etter ca. 4 ukers vekst var svulster lett detekterbare ved fysisk undersøkelse og hadde høy veksthastighet (17-33 mm3 / dag).

for å gjenskape hallmark-skiftet Av PCa-celler TIL AI, ble lncap-vertsmus kastrert ved hjelp av midscrotal snitt omtrent 8 uker etter injeksjon. Tumorer ble opprettholdt i kastrerte verter i 4 til 5 uker, da gjenværende svulster ble høstet. Totalt ble to undergrupper av celler samlet fra kastrerte verter: C4 og C5, samlet på henholdsvis 4 og 5 uker.

For ytterligere å velge FOR AI-PCa-celler ble c4-sublinen injisert med ms humane fibroblaster i en kastrert vert. De resulterende svulstene ble isolert og en ytterligere sublin ble generert, C4-2.

Karyotype sammenligninger indikerer thatLNCaP celler dyrket i intakte verter (m subline) har en modal kromosomal distribusjon antall 83, C4 Og C5 sublines med 85, Og C4 – 2 subline med 83.

for ytterligere å bekrefte at disse cellene var av menneskelig opprinnelse karyotype analyse fastslått at foreldre lncap cellene hadde 7 distinkte markør kromosomer, med to kopier av hver. M, C4, C5 og C4-2 sublines inneholdt de fleste av markør kromosomer, Med M subline er mest lik de foreldre lncap celler. C4, C5 Og C4-2 er bare minute forskjellig Fra LNCaP og m subline med tillegg av en markør kromosom som følge av et segment tillegg til kromosom 6. Et y-kromosom er ikke tilstede i De Fleste c4 -, C5-og C4-2-celler, noe som tyder på store kromosomale endringer.

c4, C5 og C4-2 sublines vokser godt under identiske vevskulturforhold som LNCaP med lignende vekstrater. Foreldre lncap, M, C4 og C5 subline har lignende baseline genuttrykk nivåer av ornithin decarboxylase (ODC) Og Prostata Spesifikt Antigen (PSA) Men, m, C4 og C5 subliner uttrykke 5-10X MER PSA mRNA. M, C4, C5 og C4-2 uttrykte også redusert human androgenreseptor mRNA som forventet i AI-celler.

Androgen Insensitivitetalle sublines ble behandlet med dihydrotestosteron (DHT), en høy affinitet ligand FOR AR. DHT-behandling fremkalte markant redusert vekst I c4-og C5-celler og ingen vekst I C4 – 2-celler sammenlignet med den høye vekstraten sett i LNCaP-celler, noe som tyder på redusert androgenfølsomhet I C4 Og C5 og AI I C4 – 2-celler. HELCELLE ar-analyse indikerte også At LNCaP-celler har en mye høyere affinitetsform AV AR (Kd = 159 pM) sammenlignet Med C4-2 (Kd = 267 pM).

TumorigenicityC4 og C5 sublines viser kraftig økt tumorigenisitet når de injiseres i intakte hannmus, i motsetning til foreldrenes lncap-celler. C4 Og C5 var også i stand til å danne svært vaskulariserte karsinomer i kastrerte mus når de ble injisert MED ms humane fibroblaster. C4 – 2-sublinen danner lettere svulster i intakte verter enn c4-og C5-subliner, og de er de eneste cellene som er i stand til å danne svulster i kastrert vert uten samtidig injeksjon AV MS-humane benfibroblaster. Disse Samme c4-2-svulstene farget FOR PSA og utskilt høye NIVÅER AV PSA i vekstmediet.