LNCaP

Wu ym. (1994) reproduced The human-derived LNCaP tumors in immunocompromised mice by co-injection of LNCaP cells with MS human bone fibroblasts. Solut pistettiin ihon alle useisiin kohtiin hiiren kylkeen ja noin 4 viikon kasvun jälkeen kasvaimet olivat helposti havaittavissa lääkärintarkastuksessa ja niiden kasvunopeus oli korkea (17-33 mm3/vrk).

lncap-isäntähiiret kastroitiin keskivartaloviiltoon noin 8 viikon kuluttua injektiosta, jotta voitiin toistaa PCA-solujen siirtyminen tekoälyyn. Kasvaimet säilyivät kastroiduissa isännissä 4-5 viikkoa, jolloin jäljellä olevat kasvaimet korjattiin. Kastroiduista isännistä kerättiin yhteensä kaksi solujoukkoa: C4 ja C5, jotka kerättiin 4 viikon ja 5 viikon kuluttua.

tekoäly-PCA-solujen valitsemiseksi C4-alalinjaan ruiskutettiin samanaikaisesti MS-ihmisen fibroblasteja kastroituun isäntään. Tuloksena olevat kasvaimet eristettiin ja syntyi ylimääräinen alalinja, C4-2.

Karyotyyppivertailut osoittavat, että ehjissä isännissä (m-aliviivalla) kasvatettujen lncap-solujen modaalinen kromosomijakauma on 83, C4-ja C5-aliviivat 85 ja C4-2-aliviivat 83.

jotta voitiin varmistaa, että nämä solut olivat ihmisperäisiä, karyotyyppianalyysi osoitti, että vanhempien LNCaP-soluissa oli 7 erillistä merkkikromosomia ja kaksi kopiota kustakin. M -, c4 -, c5-ja C4-2-alalinjat sisälsivät suurimman osan merkkikromosomeista, ja M-alalinja muistutti eniten vanhempien LNCaP-soluja. C4, C5 ja C4-2 eroavat lncap: stä ja M: n alalinjasta vain hyvin vähän siten, että kromosomi 6: een on lisätty merkkikromosomi. Y-kromosomia ei esiinny useimmissa C4 -, C5-ja C4-2-soluissa, mikä viittaa suuriin kromosomimuutoksiin.

C4 -, C5-ja C4-2-alalinjat kasvavat hyvin samanlaisissa kudosviljelyolosuhteissa kuin LNCaP, jonka kasvunopeus on sama. Vanhempien lncap -, M -, C4-ja C5-alilinjoilla on samanlaiset ornitiinidekarboksylaasin (ODC) ja Eturauhasspesifisen antigeenin (PSA) perusgeeniekspressiotasot, mutta M -, C4-ja C5-alilinjat ilmaisevat 5-10x enemmän PSA mRNA: ta. M, C4, C5 ja C4-2 ilmaisivat myös alentuneen ihmisen androgeenireseptorin mRNA: n odotetusti tekoälyn soluissa.

Androgeeniyliherkkyys kaikkia alilinjoja hoidettiin DIHYDROTESTOSTERONILLA (DHT), joka on korkean affiniteetin ligandi AR: lle. DHT-hoito vähensi merkittävästi C4-ja C5-solujen kasvua eikä kasvua C4-2-soluissa verrattuna lncap-soluissa havaittuun suureen kasvunopeuteen, mikä viittaa alentuneeseen androgeeniherkkyyteen C4-ja C5-soluissa ja AI-soluissa C4-2-soluissa. Kokosolujen ar-määritys osoitti myös, että lncap-soluilla on paljon suurempi affiniteetti AR: n muodossa (Kd = 159 pM) verrattuna C4-2: een (Kd = 267 pM).

Tuumorigeenisyysi4 – ja C5-alalinjoilla on huomattavasti suurentunut tuumorigeenisuus, kun valmistetta annetaan ehjille uroshiirille, toisin kuin vanhempien LNCaP-soluissa. C4 ja C5 pystyivät myös muodostamaan erittäin vaskularisoituneita karsinoomia kuohituilla hiirillä, kun niitä annettiin samanaikaisesti MS-ihmisen fibroblastien kanssa. C4-2-alalinja muodostaa helpommin kasvaimia ehjiin isäntiin kuin C4-ja C5-alalinjat ja ne ovat ainoita soluja, jotka pystyvät muodostamaan kasvaimia kastroituun isäntään ilman MS-ihmisen luun fibroblastien rinnakkaisinjektiota. Nämä samat C4-2-kasvaimet värjäytyivät PSA: lle ja erittivät suuria PSA-pitoisuuksia kasvualustaan.