LNCaP
Wu et al. (1994) reprodukálta az emberi eredetű lncap daganatokat immunhiányos egerekben az LNCAP sejtek MS humán csontfibroblasztokkal történő együttes injekciójával. A sejteket subcutan injektálták több helyre az egér szárnyába, és körülbelül 4 hetes növekedés után a daganatok fizikális vizsgálattal könnyen kimutathatók voltak, és magas növekedési sebességgel rendelkeztek (17-33 mm3/nap).
a PCA sejtek AI-re történő fémjelzőeltolódásának megismétléséhez az lncap gazdaszervezet egereit kasztráltuk középrotális metszés körülbelül 8 héttel az injekció beadása után. A daganatokat kasztrált gazdaszervezetekben 4-5 hétig tartották fenn, ekkor a fennmaradó daganatokat betakarították. Összesen a sejtek két részhalmazát gyűjtötték a kasztrált gazdaszervezetekből:C4 és C5, a 4., illetve az 5. héten.
az AI-PCa sejtek további kiválasztásához a C4 szublint MS humán fibroblasztokkal együtt injektáltuk egy kasztrált gazdaszervezetbe. A kapott daganatokat izoláltuk, és egy további subline keletkezett, C4-2.
a kariotípus-összehasonlítások azt mutatják, hogy az intakt gazdasejtekben (M subline) termesztett lncap sejtek modális kromoszóma-eloszlási száma 83, a C4 és C5 subline 85, a C4-2 subline pedig 83.
annak további igazolására, hogy ezek a sejtek emberi eredetűek voltak, a kariotípus-elemzés megállapította, hogy a szülői LNCaP sejteknek 7 különálló marker kromoszómája volt, mindegyikből két példányban. Az M, C4, C5 és C4-2 alvonalak tartalmazták a legtöbb marker kromoszómát, az M alvonal leginkább a szülői LNCaP sejtekhez hasonlít. A C4, C5 és C4-2 csak aprólékosan különbözik az LNCaP-tól és az M subline-tól, egy marker kromoszóma hozzáadásával, amely a 6.kromoszóma szegmensének hozzáadásából származik. Az Y kromoszóma nincs jelen a legtöbb C4, C5 és C4-2 sejtben, ami jelentős kromoszóma-változásokra utal.
a C4, C5 és C4-2 szublinek ugyanolyan szövettenyészeti körülmények között jól növekednek, mint az LNCaP, hasonló növekedési sebességgel. A szülői LNCaP, M, C4 és C5 szublin hasonló kiindulási génexpressziós szinttel rendelkezik az ornitin-dekarboxiláz (ODC) és a prosztata-specifikus antigén (PSA) esetében, azonban az M, C4 és C5 szublinok 5-10-szer több PSA mRNS-t expresszálnak. Az M, C4, C5 és C4-2 szintén csökkent humán androgénreceptor mRNS-t expresszált az AI sejtekben vártnak megfelelően.
androgén Érzéketlenségminden szublint dihidrotesztoszteronnal (DHT) kezeltünk, amely nagy affinitású ligandum az AR számára. A DHT-kezelés jelentősen csökkentette a C4 és C5 sejtek növekedését, és nem növekedett a C4-2 sejtekben az LNCaP sejtekben tapasztalt magas növekedési ütemhez képest, ami arra utal, hogy csökkent az androgénérzékenység a C4 és C5 sejtekben, valamint az AI a C4-2 sejtekben. A teljes sejtes AR vizsgálat azt is jelezte, hogy az LNCaP sejtek sokkal nagyobb ar affinitással rendelkeznek (Kd = 159 pM), mint a C4-2 (Kd = 267 pM).
a Tumorigenicitás4 és C5 alvonalak nagymértékben megnövekedett tumorigenitást mutatnak, ha intakt hím egerekbe injektálják, ellentétben a szülői LNCaP sejtekkel. A C4 és C5 szintén képes volt erősen vascularizált carcinomákat képezni ivartalanított egerekben, amikor MS humán fibroblasztokkal együtt adták be őket. A C4-2 szublin könnyebben képez tumorokat az intakt gazdaszervezetekben, mint a C4 és C5 szublinek, és ezek az egyetlen sejtek, amelyek képesek tumorokat képezni a kasztrált gazdaszervezetben az MS humán csont fibroblasztok együttes injekciója nélkül. Ugyanezek a C4 – 2 tumorok PSA-ra festettek, és magas PSA-szintet szekretáltak a növekedési közegbe.