LNCaP

Wu et al. (1 9 9 4)は、LNCAP細胞をMSヒト骨線維芽細胞と同時注射することにより、免疫不全マウスにおけるヒト由来のLncap腫瘍を再現した。 細胞は、マウスの脇腹に複数の部位に皮下注射され、成長の約4週間後、腫瘍は身体検査によって容易に検出され、成長率が高かった(17-33mm3/日)。

PCa細胞のAIへの特徴的なシフトを再現するために、LNCaP宿主マウスを注射後約8週間で中陰切開により去勢した。 腫瘍を去勢された宿主中で4〜5週間維持し、その時点で残りの腫瘍を採取した。 合計で、去勢された宿主から細胞の二つのサブセットを収集した:C4およびC5は、それぞれ4および5週間で収集した。

AI-PCa細胞をさらに選択するために、c4サブラインにMSヒト線維芽細胞を同時注入し、去勢された宿主に投与した。 得られた腫瘍を単離し、追加のサブラインであるC4-2を生成した。

核型の比較は、無傷の宿主(Mサブライン)で成長したlncap細胞が83、C4およびC5サブラインが85、C4-2サブラインが83のモーダル染色体分布番号を有することを示している。

これらの細胞がヒト起源の核型であることをさらに検証するために、親LNCaP細胞は7つの異なるマーカー染色体を有し、それぞれのコピーが2つあるこ M、C4、C5、およびC4-2サブラインは、mサブラインは親LNCaP細胞に最も類似していると、マーカー染色体のほとんどを含んでいました。 C4、C5およびC4-2は、6番染色体へのセグメント付加から生じるマーカー染色体の付加を伴うLNCaPおよびMサブラインとは微妙に区別されるだけである。 Y染色体はほとんどのC4、C5およびC4-2細胞には存在せず、主要な染色体変化を示唆している。

C4、C5、およびC4-2サブラインは、同様の成長速度を有するLNCaPと同一の組織培養条件下で良好に成長する。 親LNCaP、M、C4、およびC5サブラインは、オルニチンデカルボキシラーゼ(ODC)と前立腺特異抗原(PSA)の同様のベースライン遺伝子発現レベルを持っているが、M、C4、およ M、C4、C5およびC4-2はまたAIの細胞で予想されるように減らされた人間の男性ホルモンの受容器mRNAを表現しました。

アンドロゲン感受性すべてのサブラインは、ARの高親和性リガンドであるジヒドロテストステロン(DHT)で処理されました。 DHTの処置はC4およびC5細胞の著しく減らされた成長およびC4-2細胞の成長をc4およびC5およびC4-2細胞のAIの減らされた男性ホルモンの感 全細胞A Rアッセイはまた、Lncap細胞が、C4−2(Kd=2 6 7pM)と比較したときに、はるかに高い親和性形態のA R(Kd=1 5 9pM)を有することを示した。

Tumorigenicityc4およびC5サブラインは、親LNCaP細胞とは異なり、無傷の雄マウスに注入すると、大幅に増加したtumorigenicityを示す。 C4とC5はまた、MSヒト線維芽細胞と同時注入したときに去勢マウスで高度に血管新生癌を形成することができた。 C4-2サブラインは、c4およびC5サブラインよりも無傷の宿主において腫瘍をより容易に形成し、MSヒト骨線維芽細胞の同時注射なしに去勢された これらの同じC4-2腫瘍はPSAについて染色され、高レベルのPSAを成長培地に分泌した。