LNCaP

vu et al. (1994) reproducerede de humane afledte lncap-tumorer i immunkompromitterede mus ved samtidig injektion af LNCaP-celler med MS humane knoglefibroblaster. 4 ugers vækst kunne tumorer let påvises ved fysisk undersøgelse og havde en høj væksthastighed (17-33 mm3/dag).

for at replikere kendetegnende skift af PCa-celler til AI blev lncap-værtsmus kastreret ved hjælp af midscrotal snit ca.8 uger efter injektion. Tumorer blev opretholdt i kastrerede værter i 4 til 5 uger, på hvilket tidspunkt de resterende tumorer blev høstet. I alt blev to undergrupper af celler opsamlet fra kastrerede værter: C4 og C5, opsamlet efter henholdsvis 4 og 5 uger.

for yderligere at vælge for AI-PCa-celler blev C4-underlinjen injiceret sammen med MS humane fibroblaster i en kastreret vært. De resulterende tumorer blev isoleret, og en yderligere underlinie blev genereret, C4-2.

karyotype sammenligninger indikerer detlncap celler dyrket i intakte værter (M subline) har et modalt kromosomalt fordelingsnummer på 83, C4 og C5 sublines med 85 og C4-2 subline med 83.

for yderligere at verificere, at disse celler var af human oprindelse, bestemte karyotypeanalyse, at forældrenes lncap-celler havde 7 forskellige markørkromosomer med to kopier af hver. Underlinjerne m, C4, C5 og C4-2 indeholdt de fleste af markørkromosomerne, hvor M-underlinjen lignede mest forældrenes lncap-celler. C4, C5 og C4-2 adskiller sig kun minutiøst fra lncap og m-underlinjen med tilsætning af et markørkromosom som følge af en segmenttilsætning til kromosom 6. Et Y-kromosom er ikke til stede i de fleste C4 -, C5-og C4-2-celler, hvilket antyder større kromosomale ændringer.

C4 -, C5-og C4-2-dellinjer vokser godt under identiske vævskulturbetingelser som LNCaP med lignende vækstrater. Parental lncap, M, C4 og C5 subline har lignende baseline genekspression niveauer af ornithin decarboksylase (ODC) og prostata specifikt Antigen (PSA) men m, C4 og C5 sublines udtrykker 5-10 gange mere PSA mRNA. M, C4, C5 og C4-2 udtrykte også reduceret human androgenreceptor mRNA som forventet i AI-celler.

Androgeninsensitivitetalle dellinjer blev behandlet med dihydrotestosteron (DHT), en ligand med høj affinitet for AR. DHT-behandling fremkaldte markant reduceret vækst i C4-og C5-celler og ingen vækst i C4-2-celler sammenlignet med den høje væksthastighed, der ses i lncap-celler, hvilket antyder reduceret androgenfølsomhed i C4 og C5 og AI i C4-2-celler. Helcelle AR-analyse indikerede også, at lncap-celler har en meget højere affinitetsform af AR (Kd = 159 pM) sammenlignet med C4-2 (Kd = 267 pM).

TumorigenicityC4-og C5-dellinjer udviser stærkt øget tumorigenicitet, når de injiceres i intakte hanmus, i modsætning til forældrenes lncap-celler. C4 og C5 var også i stand til at danne stærkt vaskulariserede karcinomer i kastrerede mus, når de blev injiceret sammen med MS humane fibroblaster. C4 – 2-underlinjen danner lettere tumorer i intakte værter end C4-og C5-underlinjer, og de er de eneste celler, der er i stand til at danne tumorer i kastreret vært uden samtidig injektion af MS humane knoglefibroblaster. Disse samme C4-2 tumorer farves for PSA og udskilles høje niveauer af PSA i vækstmediet.