LNCaP

Wu și colab. (1994) a reprodus tumorile lncap derivate din om la șoareci imunocompromiși prin co-injectarea celulelor LNCaP cu fibroblaste osoase umane MS. Celulele au fost injectate subcutanat în mai multe locuri în flancul mouse-ului și după aproximativ 4 săptămâni de creștere, tumorile au fost ușor detectabile prin examinare fizică și au avut o rată ridicată de creștere (17-33 mm3/zi).

pentru a reproduce trecerea distinctivă a celulelor PCa la AI, șoarecii gazdă LNCaP au fost castrați prin incizie midscrotală la aproximativ 8 săptămâni după injectare. Tumorile au fost menținute în gazdele castrate timp de 4 până la 5 săptămâni, moment în care au fost recoltate tumorile rămase. În total, două subseturi de celule au fost colectate de la gazdele castrate: C4 și C5, colectate la 4 și respectiv 5 săptămâni.

pentru a selecta în continuare celulele AI-PCa, sublina C4 a fost injectată concomitent cu fibroblaste umane MS într-o gazdă castrată. Tumorile rezultate au fost izolate și a fost generată o sublină suplimentară, C4-2.

comparațiile cariotipului indică faptul căcelulele cap crescute în gazde intacte (subline M) au un număr de distribuție cromozomială modală de 83, subline C4 și C5 cu 85 și subline C4-2 cu 83.

pentru a verifica în continuare că aceste celule erau de origine umană, analiza cariotipului a determinat că celulele parentale LNCaP aveau 7 cromozomi markeri distincți, cu două copii ale fiecăruia. Sublinele M, C4, C5 și C4-2 conțineau majoritatea cromozomilor marker, sublina M fiind cea mai asemănătoare cu celulele LNCaP parentale. C4, C5 și C4-2 sunt doar minuțios distincte de lncap și sublinia M cu adăugarea unui cromozom marker rezultat dintr-un segment adăugat la cromozomul 6. Un cromozom Y nu este prezent în majoritatea celulelor C4, C5 și C4-2, sugerând modificări cromozomiale majore.

sublinele C4, C5 și C4-2 cresc bine în condiții identice de cultură tisulară ca LNCaP cu rate de creștere similare. Lncap Parental, m, C4 și C5 subline au niveluri similare de expresie a genei inițiale de ornitină decarboxilază (ODC) și Antigen specific prostatic (PSA) cu toate acestea, sublinele M, C4 și C5 exprimă 5-10X mai mult ARNm PSA. M, C4, C5 și C4-2 au exprimat, de asemenea, ARNm redus al receptorilor androgeni umani, așa cum era de așteptat în celulele AI.

insensibilitate Androgenătoate sublinele au fost tratate cu dihidrotestosteron (DHT), un ligand cu afinitate ridicată pentru AR. Tratamentul cu DHT a determinat o creștere semnificativ redusă a celulelor C4 și C5 și nici o creștere a celulelor C4-2 în comparație cu rata ridicată de creștere observată în celulele LNCaP, sugerând o sensibilitate redusă la androgeni în celulele C4 și C5 și AI în celulele C4-2. Testul ar cu celule întregi a indicat, de asemenea, că celulele LNCaP au o formă de afinitate mult mai mare de AR (Kd = 159 pM) în comparație cu C4-2 (Kd = 267 pM).

Subliniile TumorigenicityC4 și C5 prezintă o tumorigenitate mult crescută atunci când sunt injectate la șoareci masculi intacti, spre deosebire de celulele LNCaP parentale. C4 și C5 au fost, de asemenea, capabili să formeze carcinoame foarte vascularizate la șoarecii castrați atunci când au fost injectați Co-injectați cu fibroblaste umane MS. Sublina C4-2 formează mai ușor tumori în gazdele intacte decât sublinele C4 și C5 și sunt singurele celule capabile să formeze tumori în gazda castrată fără co-injectarea fibroblastelor osoase umane MS. Aceleași tumori C4 – 2 colorate pentru PSA și au secretat niveluri ridicate de PSA în mediul de creștere.