G418 (Geneticina)

Preguntas frecuentes

¿Por qué una de mis botellas de G418 se solidifica cuando se almacena a -20°C, mientras que otra permanece completamente líquida y translúcida?
observamos el mismo fenómeno internamente. Incluso por debajo de 0°C, la reacción de congelación de la solución no comienza espontáneamente, ya que necesita una perturbación para comenzar. Esta perturbación puede ser una vibración, un choque, etc. Según nuestros científicos, a menudo observamos diferencias en la solidificación entre varios tubos de G418, lo que puede explicarse debido a un pequeño choque en un tubo y no en los otros.
Tenga en cuenta que tan pronto como se ha producido la solidificación en el líquido, se comporta como una reacción en cadena y se propaga rápidamente por todo el volumen de solución disponible.

¿Cuál es el método de almacenamiento preferido para G418?
El G418 se envía a temperatura ambiente. Una vez recibido, debe almacenarse a 4°C para almacenamiento a corto plazo o a -20°C para almacenamiento a largo plazo. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación. La fecha de caducidad se especifica en la etiqueta del producto. Una vez abierto, permanece estable durante 1 año a -20°C, evitando ciclos repetidos de congelación y descongelación, y puede mantenerse a 4°C durante 3 meses, siempre que se mantenga en condiciones estériles.

¿Cuál es la concentración de selección de G418 en células de mamíferos?
La concentración de trabajo de G418 para la selección y el mantenimiento de líneas celulares de mamíferos transfectadas con el gen neo varía dependiendo de una multitud de factores, incluido el tipo de célula. Por lo tanto, recomendamos determinar la concentración óptima de antibiótico necesaria para matar la línea celular huésped tratando inicialmente sus células con varias concentraciones (por ejemplo, 100 µg/ml – 1 mg/ml). Nota: G418 se usa regularmente a 400 µg / ml.

Mi plásmido tiene el gen Neo. ¿Puedo usar G418 para seleccionarlo en E. coli?
No. El G418 solo se puede usar en células de mamíferos que expresan el gen Neo. El antibiótico apropiado para la selección de transformantes de E. coli que expresan el gen Neo es la Kanamicina.