G418 (Geneticin)

Ofte Stillede Spørgsmål

hvorfor størkner en af mine flasker G418, når de opbevares ved -20 liter C, mens en anden forbliver fuldstændig flydende og gennemskinnelig?
vi observerer det samme fænomen internt. Selv under 0 liter C starter opløsningens frysereaktion ikke spontant, da den har brug for en forstyrrelse for at starte. Denne forstyrrelse kan være en vibration, et chok osv. Ifølge vores forskere observerer vi ofte forskelle i størkning mellem flere rør af G418, hvilket kan forklares på grund af et lille stød på et rør og ikke de andre.
bemærk, at så snart størkning har fundet sted i væsken, opfører den sig som en kædereaktion og spreder sig hurtigt gennem det tilgængelige volumen af opløsning.

Hvad er den foretrukne opbevaringsmetode for G418?
G418 sendes ved stuetemperatur. Ved modtagelse, det skal opbevares ved 4 liter C til kortvarig opbevaring eller -20 liter C til langtidsopbevaring. Undgå gentagne fryse-tø cyklusser. Udløbsdatoen er angivet på produktetiketten. Når den er åbnet, forbliver den stabil i 1 år ved -20 kg C, forudsat at du undgår gentagne frysetøningscyklusser, og det kan opbevares ved 4 kg C til 3 måneder, forudsat at det opbevares under sterile forhold.

Hvad er selektionskoncentrationen af G418 i pattedyrceller?
arbejdskoncentrationen af G418 til udvælgelse og vedligeholdelse af pattedyrscellelinjer transficeret med neo-genet varierer afhængigt af en lang række faktorer, herunder celletype. Derfor anbefaler vi at bestemme den optimale koncentration af antibiotika, der kræves for at dræbe din værtscellelinie ved først at behandle dine celler med flere koncentrationer (f.eks. 100 liter/ml – 1 mg/ml). Bemærk: G418 bruges regelmæssigt til 400 liter/ml.

mit plasmid har Neo-genet. Kan jeg bruge G418 til at vælge det i E. coli?
Nej. G418 kan kun anvendes i pattedyrceller, der udtrykker Neo-genet. Det passende antibiotikum til selektion for E. coli-transformanter, der udtrykker Neo-genet, er Kanamycin.