G418 (Geneticin)

Vanliga frågor

varför stelnar en av mina flaskor med G418 när de lagras vid -20 2CB C, medan en annan förblir helt flytande och genomskinlig?
vi observerar samma fenomen internt. Till och med under 0 kg C startar inte frysreaktionen av lösningen spontant eftersom den behöver en störning för att starta. Denna störning kan vara en vibration, en chock etc. Enligt våra forskare observerar vi ofta skillnader i stelning mellan flera rör av G418, vilket kan förklaras på grund av en liten chock mot ett rör och inte de andra.
Observera att så snart stelningen har inträffat i vätskan, uppträder den som en kedjereaktion och sprider sig snabbt genom den tillgängliga volymen av lösningen.

Vad är den föredragna lagringsmetoden för G418?
G418 levereras vid rumstemperatur. Vid mottagandet ska den lagras vid 4 CCG för korttidslagring eller -20 CCG för långvarig lagring. Undvik upprepade frys-tina cykler. Utgångsdatumet anges på produktetiketten. När den väl öppnats förblir den stabil i 1 år vid -20 CCG förutsatt att du undviker upprepade frysnings-tina cykler, och den kan hållas vid 4 CCG i 3 månader förutsatt att den hålls i sterila förhållanden.

vad är urvalskoncentrationen av G418 i däggdjursceller?
arbetskoncentrationen av G418 för urval och underhåll av däggdjurscellinjer transfekterade med neo-genen varierar beroende på en mängd faktorer, inklusive celltyp. Därför rekommenderar vi att du bestämmer den optimala koncentrationen av antibiotika som krävs för att döda din värdcellinje genom att initialt behandla dina celler med flera koncentrationer (t.ex. 100 oc/ml – 1 mg/ml). Observera: G418 används regelbundet vid 400 occurg / ml.

min plasmid har Neo-genen. Kan jag använda G418 för att välja det i E. coli?
Nej. G418 kan endast användas i däggdjursceller som uttrycker Neo-genen. Det lämpliga antibiotikumet för val för E. coli-transformanter som uttrycker Neo-genen är Kanamycin.