G418 (Geneticin)

FAQ

Perché una delle mie bottiglie di G418 solidifica se conservata a -20°C, mentre un’altra rimane completamente liquida e traslucida?
Osserviamo lo stesso fenomeno internamente. Anche al di sotto di 0°C, la reazione di congelamento della soluzione non inizia spontaneamente in quanto ha bisogno di un disturbo per iniziare. Questo disturbo può essere una vibrazione, uno shock, ecc. Secondo i nostri scienziati, spesso osserviamo differenze nella solidificazione tra diversi tubi di G418, che possono essere spiegate a causa di un piccolo shock a un tubo e non agli altri.
Si noti che non appena si è verificata la solidificazione nel liquido, si comporta come una reazione a catena e si diffonde rapidamente in tutto il volume di soluzione disponibile.

Qual è il metodo di archiviazione preferito per G418?
G418 viene spedito a temperatura ambiente. Al ricevimento, deve essere conservato a 4°C per la conservazione a breve termine o -20°C per la conservazione a lungo termine. Evitare ripetuti cicli di gelo-disgelo. La data di scadenza è specificata sull’etichetta del prodotto. Una volta aperto rimane stabile per 1 anno a -20 ° C fornendo evitare ripetuti cicli di gelo-disgelo, e può essere mantenuto a 4°C per 3 mesi purché sia mantenuto in condizioni sterili.

Qual è la concentrazione di selezione di G418 nelle cellule di mammifero?
La concentrazione di lavoro di G418 per la selezione e il mantenimento di linee cellulari di mammiferi trasfettate con il gene neo varia a seconda di una moltitudine di fattori, incluso il tipo di cellula. Pertanto, si consiglia di determinare la concentrazione ottimale di antibiotico necessaria per uccidere la linea cellulare ospite trattando inizialmente le cellule con diverse concentrazioni (ad esempio 100 µg/ml – 1 mg/ml). Nota: G418 viene regolarmente utilizzato a 400 µg / ml.

Il mio plasmide ha il gene Neo. Posso usare G418 per selezionare per esso in E. coli?
N. G418 può essere utilizzato solo in cellule di mammifero che esprimono il gene Neo. L’antibiotico appropriato per la selezione dei trasformanti di E. coli che esprimono il gene Neo è la Kanamicina.