G418 (Généticine)
FAQ
Pourquoi un de mes flacons de G418 se solidifie-t-il lorsqu’il est conservé à -20 °C, alors qu’un autre reste complètement liquide et translucide?
On observe le même phénomène en interne. Même en dessous de 0°C, la réaction de congélation de la solution ne démarre pas spontanément car elle a besoin d’une perturbation pour démarrer. Cette perturbation peut être une vibration, un choc, etc. Selon nos scientifiques, nous observons souvent des différences de solidification entre plusieurs tubes de G418, ce qui peut s’expliquer par un petit choc sur un tube et non sur les autres.
Veuillez noter que dès que la solidification s’est produite dans le liquide, celui-ci se comporte comme une réaction en chaîne et se propage rapidement dans tout le volume de solution disponible.
Quelle est la méthode de stockage préférée pour G418?
G418 est expédié à température ambiante. Dès réception, il doit être conservé à 4 ° C pour un stockage à court terme ou à -20 ° C pour un stockage à long terme. Évitez les cycles répétés de gel-dégel. La date de péremption est indiquée sur l’étiquette du produit. Une fois ouvert, il reste stable pendant 1 an à -20 ° C à condition d’éviter les cycles de gel-dégel répétés, et il peut être conservé à 4 ° C pendant 3 mois à condition d’être conservé dans des conditions stériles.
Quelle est la concentration de sélection de G418 dans les cellules de mammifères?
La concentration de travail de G418 pour la sélection et le maintien de lignées cellulaires de mammifères transfectées avec le gène neo varie en fonction d’une multitude de facteurs, y compris le type cellulaire. Par conséquent, nous vous recommandons de déterminer la concentration optimale d’antibiotique nécessaire pour tuer votre lignée cellulaire hôte en traitant initialement vos cellules avec plusieurs concentrations (par exemple 100 µg / ml – 1 mg / ml). Remarque : le G418 est régulièrement utilisé à 400 µg/ml.
Mon plasmide a le gène Neo. Puis-je utiliser G418 pour le sélectionner dans E. coli?
Non. G418 ne peut être utilisé que dans les cellules de mammifères exprimant le gène Neo. L’antibiotique approprié pour la sélection des transformants d’E. coli exprimant le gène Neo est la kanamycine.