G418 (genetyka)

FAQs

dlaczego jedna z moich butelek G418 zestala się, gdy jest przechowywana w temperaturze -20°C, podczas gdy inna pozostaje całkowicie płynna i półprzezroczysta?
obserwujemy to samo zjawisko wewnętrznie. Nawet w temperaturze poniżej 0°C reakcja zamrażania roztworu nie rozpoczyna się samoistnie, ponieważ do jej rozpoczęcia potrzebne jest zaburzenie. To zaburzenie może być wibracją, wstrząsem itp. Według naszych naukowców często obserwujemy różnice w krzepnięciu między kilkoma rurkami G418, co można wyjaśnić niewielkim wstrząsem jednej rury, a nie innych.
należy pamiętać, że gdy tylko nastąpi zestalenie w cieczy, zachowuje się ona jak reakcja łańcuchowa i szybko rozprzestrzenia się w całej dostępnej objętości roztworu.

jaka jest preferowana metoda przechowywania G418?
G418 jest wysyłany w temperaturze pokojowej. Po otrzymaniu należy go przechowywać w temperaturze 4°c w przypadku krótkotrwałego przechowywania lub -20°C w przypadku długotrwałego przechowywania. Unikaj powtarzających się cykli zamrażania i rozmrażania. Termin ważności jest podany na etykiecie produktu. Po otwarciu pozostaje stabilny przez 1 rok w temperaturze -20°C, co pozwala uniknąć powtarzających się cykli zamrażania i rozmrażania, i można go przechowywać w temperaturze 4°C przez 3 miesiące, pod warunkiem, że jest przechowywany w sterylnych warunkach.

jakie jest stężenie selekcyjne G418 w komórkach ssaków?
stężenie robocze G418 w celu selekcji i utrzymania linii komórkowych ssaków transfekowanych genem neo różni się w zależności od wielu czynników, w tym rodzaju komórki. Dlatego zalecamy określenie optymalnego stężenia antybiotyku wymaganego do zabicia linii komórkowej gospodarza, początkowo traktując komórki kilkoma stężeniami (np. 100 µg/ml – 1 mg/ml). Uwaga: G418 jest regularnie stosowany w dawce 400 µg / ml.

mój plazmid ma gen Neo. Czy mogę użyć G418, aby wybrać go w E. coli?
Nie G418 może być stosowany wyłącznie w komórkach ssaków wykazujących ekspresję genu Neo. Odpowiednim antybiotykiem do selekcji transformantów E. coli wykazujących ekspresję genu Neo jest kanamycyna.